%A 孙宝航行 1,鲁奕 1,王怡沁 1,周嘉乐 1,林梦璐 1,宋玮 2,姜萌 1,卜军 1 %T 单个细胞来源胎盘间充质干细胞培养方法的比较研究 %0 Journal Article %D 2018 %J 上海交通大学学报(医学版) %R 10.3969/j.issn.1674-8115.2018.09.006 %P 1033- %V 38 %N 9 %U {https://xuebao.shsmu.edu.cn/CN/abstract/article_12019.shtml} %8 2018-09-28 %X 目的 ·观察胚胎来源间充质干细胞( placental derived mesenchymal stem cells,PMSCs)在人血小板裂解液( human platelet lysate,HPL)、碱性成纤维细胞生长因子( basic fibroblast growth factor,bFGF)及传统的胎牛血清( fetal bovine serum,FBS)不同组合的培养基中的倍增数目及细胞性状,着重探索更合适的 PMSCs培养体系。方法 ·分离单个细胞来源 PMSCs,扩增后分别用 4种培养基孵育,分为 FBS组、FBS+bFGF组、HPL组以及 HPL+bFGF组。观察细胞形态及生长状态、细胞表型及多能分化。在 P1、 P2、P3、P4代进行计数。取 P4代细胞接种,分析集落形成单位的个数。结果 ·经鉴定, PMSCs具有间充质干细胞的生物特性。数量上, FBS+bFGF组在 P4代达到( 1.12×107)个 /cm2,HPL组达到( 1.24×107)个 /cm2(P>0.05),而 FBS组和 HPL+bFGF组则只有(5.58×106)个 /cm2和(8.56×106)个 /cm2。细胞形态上, FBS+bFGF组与 HPL组 P4代的 PMSCs均保持贴壁生长,但 HPL组细胞于 P5代无法贴壁生长。细胞集落数量上, P4代时, FBS+bFGF组为 51个 /孔,HPL为 52个 /孔(P>0.05)。细胞生物学特性上,FBS+bFGF组和 HPL组在 P4代时均能基本保有间充质干细胞的特性和多能分化的能力。结论 ·从细胞数量上来看, HPL组中的 P4代细胞数与目前常用的 FBS+bFGF培养基没有显著差异,且已达到临床治疗剂量需求;从细胞生物学特性上来看, HPL培养基与 FBS+bFGF培养基均能基本保持 PMSCs细胞特性和多能分化的能力。但由于 HPL培养基免疫原性低,因此更适合临床移植应用。然而,由于 HPL培养基无法维持 PMSCs生长至 5代以后,故无法用于大规模细胞扩增。HPL+bFGF在目前实验条件下并不具备优势。