%A 王烨,谢旺,张洁,盛洁莹,郭忠良 %T Hsa-miRNA124-3p 调控肺癌细胞株NCI-H460 增殖和迁移的作用机制 %0 Journal Article %D 2017 %J 上海交通大学学报(医学版) %R 10.3969/j.issn.1674-8115.2017.08.001 %P 1051- %V 37 %N 8 %U {https://xuebao.shsmu.edu.cn/CN/abstract/article_11632.shtml} %8 2017-08-28 %X 目的 · 研究 hsa-miRNA124-3p 调控肺癌细胞 NCI-H460 增殖和迁移的作用及机制。方法 · 取临床肺癌及其癌旁组织标本 4 对, 分别检测组织中hsa-miRNA124-3p 及 Krüppel 样因子4(KLF4)蛋白含量。生物信息学预测hsa-miRNA124-3p 与 KLF4 基因3’-UTR 有理论结合位点,并通过荧光素酶报告基因实验进行验证。转染pshRNA-Sponge-miRNA124 或 pshRNA-KLF4 到 NCI-H460 细胞,转 染后48 h 确定细胞转染效率,MTT 检测 NCI-H460 细胞对数期增殖活性,划线法检测细胞迁移变化。结果 · 在检测的4 对标本中, hsa-miRNA124-3p 在肿瘤组织中的含量明显高于癌旁组织(P<0.01),而肺癌组织中KLF4 蛋白表达明显低于癌旁组织(P<0.01)。 生物信息学分析结果显示,hsa-miRNA124-3p 在 KLF4 基因3’-UTR 有 8 个碱基的理论结合位点“5’-UGCCUUAA-3’”。荧光素酶活 性检测数据显示,hsa-miRNA124-3p 可以结合于KLF4 基因3’-UTR 并对蛋白表达进行负调控。细胞转染后72 h,pshRNA-SpongemiRNA124 转染组细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.01), pshRNA-KLF4 转染组细胞增殖活性较对照组增强(P<0.05), pshRNASponge-miRNA124 与 pshRNA-KLF4 共转染组细胞增殖活性与对照组比较,无显著差异(P>0.05)。细胞迁移检测数据表明,不同处 理组细胞转染后72 h 细胞迁移能力变化与增殖活性的变化趋势完全一致。结论 · Hsa-miRNA124-3p 通过抑制KLF4 基因表达,增强 NCI-H460 细胞的增殖和迁移;敲减细胞内 hsa-miRNA124-3p,可以通过上调 KLF4 蛋白表达抑制 NCI-H460 细胞增殖和迁移活性。