%A 蒋 佳, 范存义, 曾炳芳 %T 慢病毒介导BMP2和VEGF165基因共转染对骨髓基质干细胞成骨分化的影响 %0 Journal Article %D 2011 %J 上海交通大学学报(医学版) %R 10.3969/j.issn.1674-8115.2011.06.016 %P 753- %V 31 %N 6 %U {https://xuebao.shsmu.edu.cn/CN/abstract/article_9125.shtml} %8 2011-06-28 %X

目的 观察慢病毒介导骨形成蛋白2 (BMP2)和血管内皮生长因子165(VEGF165)基因共转染对骨髓基质干细胞(MSCs)成骨分化的影响。方法 构建携带BMP2、VEGF165和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组慢病毒表达载体,包装、生产携带BMP2、VEGF165和GFP基因的重组慢病毒(Lv-BMP、Lv-VEGF、Lv-GFP)。分离、培养Wistar大鼠骨髓MSCs,分别以Lv-GFP(GFP组)、Lv-BMP(BMP组)、Lv-VEGF(VEGF组)转染MSCs,Lv-BMP和Lv-VEGF共转染MSCs(BMP+VEGF组),另设未转染MSCs对照组。RT-PCR法检测转染后7 d各组细胞BMP2、VEGF165 mRNA表达以及转染后1、2、4周各组细胞骨钙素(OCN) mRNA表达;ELISA法检测转染后1、4、8周各组细胞培养上清液BMP2、VEGF165蛋白表达以及转染后1、2、4周各组细胞培养上清液OCN蛋白表达;转染后第14天,各组细胞行碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性检测。结果 BMP+VEGF组BMP2、VEGF165 mRNA和蛋白高效共表达,BMP2 mRNA和蛋白表达与BMP组比较差异无统计学意义(P>0.05),VEGF165 mRNA和蛋白表达与VEGF组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组、GFP组和VEGF组无BMP2 mRNA和蛋白表达;对照组、GFP组和BMP组无VEGF165 mRNA和蛋白表达;BMP+VEGF组OCN mRNA和蛋白表达显著高于其他各组(P<0.01)。BMP+VEGF组ALP染色阳性区域大于对照组、VEGF组和BMP组;BMP+VEGF组ALP活性显著高于其他各组(P<0.01)。结论 慢病毒介导BMP2和VEGF165基因共转染可促进骨髓MSCs成骨分化。