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    1. Prrx1 +牙周膜干细胞在牙移动过程中的谱系示踪
    汪席均, 金安婷, 黄湘如, 徐弘远, 高昕, 杨屹羚, 代庆刚, 江凌勇
    2022, 42 (8): 1008-1015.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.08.005

    摘要82)   HTML10)    PDF(pc) (4046KB)(478)    收藏

    目的·通过Cre/loxP重组酶系统研究牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)中配对相关同源基因1(paired related homeobox 1,Prrx1)阳性细胞谱系(Prrx1+细胞谱系)在小鼠牙移动过程中的动态分布。方法·利用Cre/loxP重组酶系统,将诱导型Prrx1-CreERT2 小鼠与R26tdTomato 荧光标记小鼠交配繁殖,并通过PCR对其子代小鼠进行基因型鉴定。取8只子代小鼠,向其腹腔注射他莫昔芬(tamoxifen,TA),以标记PDLSCs中的Prrx1+细胞谱系(即tdTomato+细胞)。于小鼠上颌左侧安置加力装置[即正畸牙移动(orthodontics tooth movement,OTM)侧],右侧未加力即为对照侧,以构建小鼠OTM模型。分别于牙移动第3日(OTM 3 d)、第7日(OTM 7 d)时处死小鼠,收集其双侧上颌磨牙及周围牙周组织,经脱钙后行包埋及冰冻切片处理。采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H-E染色)观察张力区和压力区牙周膜的改变,并利用免疫荧光染色观察Prrx1+细胞谱系在张力区及压力区的动态分布。结果·经PCR鉴定,子代小鼠基因型为Prrx1-CreERT2;R26tdTomato。随着加力装置作用的增加,OTM 7 d小鼠的牙移动距离[(87.44±4.02)μm]较OTM 3 d小鼠[(42.81±5.04)μm]明显增加,提示小鼠OTM模型构建成功。H-E染色结果显示:OTM 3 d时小鼠OTM侧压力区的牙周膜被压缩、间隙变窄,而OTM 7 d时OTM侧牙周膜宽度逐渐恢复;OTM 3 d时OTM侧张力区的牙周膜被拉伸,而OTM 7 d较OTM 3 d时牙周膜排列更规则。免疫荧光染色结果显示:OTM 3 d时OTM侧压力区牙周膜中tdTomato+细胞数量较对照侧减少,OTM 7 d时OTM侧压力区tdTomato+细胞数量较对照侧增加(均P<0.05);OTM 3 d及OTM 7 d时,OTM侧张力区tdTomato+细胞数量较对照侧均有增加(均P<0.05)。结论·成功构建了Prrx1-CreERT2;R26tdTomato 小鼠的OTM模型,并初步证实了Prrx1+细胞谱系参与OTM过程中的牙周改建。

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    2. 中国梅毒发病率的时空分布特征分析
    田婷婷, 侯雅宣, 李雨晴, 祁鸿姣, 陈默, 吕美霞
    2021, 41 (5): 648-652.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.05.015

    摘要483)   HTML17)    PDF(pc) (1308KB)(459)    收藏

    目的·了解2017年中国内地31个省、直辖市、自治区梅毒流行的时空分布。方法·由中国公共卫生科学数据中心获取2017年中国内地31个省、直辖市、自治区梅毒的发病数据,描述发病率的时间变化特征。采用全局莫兰指数和安瑟伦局部莫兰指数来分析梅毒病例的空间聚集特征,采用基于泊松分布模型的时空扫描分析探索其时空分布特征。结果·2017年中国内地31个省、直辖市、自治区梅毒总发病数为475 860例,年发病率为34.49/10万,其中隐性梅毒占比最大,达到76.78%(365 353/475 860),8月份发病率最高。从空间分布上看,梅毒发病率最高的省级单位为新疆维吾尔自治区,达91.80/10万。隐性、二期、三期、胎传梅毒均呈现空间正自相关(均P<0.05)。上海市、江苏省、浙江省表现为二期、三期梅毒高-高聚集(均P<0.05),而新疆维吾尔自治区、西藏自治区则表现为胎传梅毒高-高聚集(P=0.000)。时空扫描分析发现4月至9月,福建省、江西省、浙江省、上海市、江苏省、湖南省、安徽省和广东省是梅毒发病主聚集区域(P=0.000),此聚集区内梅毒发病风险是聚集区外的1.59倍。结论·中国内地梅毒发病率较高;各省、直辖市、自治区重点防控的梅毒类型和时段存在差异,其中4月至9月,福建省、江西省、浙江省、上海市、江苏省、湖南省、安徽省和广东省是中国内地梅毒防控的重点区域。

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    3. 靶向凝血因子FⅨa-FⅧa复合物结合位点的新型抗栓抗体
    孙天瑶, 蒋时枫, 徐沁, 刘俊岭, 党素英, 樊雪梅
    2021, 41 (9): 1133-1141.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.001

    摘要297)      PDF(pc) (6502KB)(450)    收藏

    目的·制备以内源性凝血途径中关键的凝血因子Ⅸa(coagulation factor Ⅸa,FⅨa)为靶点的单克隆抗体,并研究其抗栓功能及作用机制。方法·通过免疫小鼠、杂交瘤技术、单克隆抗体细胞表达纯化技术,制备高纯度的抗FⅨa单克隆抗体;通过酶联免疫吸附测定筛选与FⅨa具有高亲和力的单抗,利用活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)和凝血酶原时间(prothrombin time,PT)评估单抗的抗栓效果;然后利用发色底物法检测其对FⅨa酶活性的影响;采用计算机模拟蛋白-蛋白对接的方法预测抗体与FⅨa相互作用可能的结合位点,并通过竞争实验(间接通过发色底物法)对这一结合位点进行验证。结果·制备得到1种高亲和力抗FⅨa的单克隆抗体FⅨa-4;虽然它不影响PT和FⅨa的酶活性,但可显著延长APTT至88.8 s,是对照组(25.5 s)的3.5倍,并且具有浓度依赖性。蛋白-蛋白对接预测结果发现,FⅨa-4不直接与FⅨa的底物催化位点结合,而是占据了FⅨa和FⅧa的结合区域。竞争实验进一步验证了上述结果,FⅨa-4以剂量依赖的方式抑制FⅩa的生成,FⅨa-4的浓度达到400 pmol/L即可使FⅩa的生成几乎完全被抑制,而FⅧa可纠正抗体的抑制作用达到近50%。结论·获得抗FⅨa的单抗FⅨa-4;FⅨa-4与FⅧa竞争性结合FⅨa阻碍了FⅧa-FⅨa复合物形成,阻断FⅩ向FⅩa的转化,该抗体主要通过抑制内源性凝血途径发挥抗栓作用。

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    4. 肝门部胆管癌综合治疗的进展与争议
    陈炜, 刘颖斌
    2022, 42 (1): 1-8.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.001

    摘要253)   HTML94)    PDF(pc) (1076KB)(429)    收藏

    肝门部胆管癌早期诊断困难,预后较差,临床治疗存在诸多争议。目前,外科治疗仍是该病最主要的治疗方法。术前精准评估和充分准备,以及术中安全、有效、规范切除肿瘤是治疗成功的关键,以化学治疗(化疗)为主的综合治疗提高了患者的生存期。未来以肿瘤学理念为指导,包括手术、化疗、靶向、免疫和生物治疗多种模式的综合治疗是肝门部胆管癌治疗的发展趋势。

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    5. 巨胞饮途径介导的新冠原始株病毒蛋白入胞的细胞水平初步研究
    江淦, 杨于权, 陈曜星, 侯照远, 高小玲, 陈红专, 贾浩
    2022, 42 (8): 987-996.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.08.003

    摘要74)   HTML9)    PDF(pc) (8168KB)(425)    收藏

    目的·探讨严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)原始株的几种关键蛋白对多种细胞模型巨胞饮途径的影响。方法·①利用免疫共沉淀技术探索SARS-COV-2原始株的刺突蛋白受体结合域(spike protein receptor-binding domain,S-RBD)、核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,N)和非结构蛋白7(non-structural protein-7,NSP7)等病毒蛋白与HEK-293T细胞内蛋白的相互作用。②于体外,将SARS-CoV-2原始株的S-RBD、N、NSP7病毒蛋白分别与HEK-293T/bEnd.3/Beas-2b细胞(正常细胞模型)共孵育,利用巨胞饮标志物——异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的70 kDa葡聚糖(FITC-70 kDa-葡聚糖)水平的变化观察上述细胞巨胞饮水平的改变。③利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的炎症细胞模型,分析SARS-CoV-2原始株的病毒蛋白对该炎症细胞的巨胞饮水平的改变。④在正常细胞模型和炎症细胞模型中,利用5-(N-乙基-N-异丙基)阿米洛利(EIPA)或载带Rab5小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的脂蛋白纳米药物载体分别抑制由SARS-CoV-2病毒蛋白诱导的巨胞饮作用,进一步观察细胞对S-RBD、N、NSP7病毒蛋白的摄取情况。结果·① SARS-CoV-2原始株的3个病毒蛋白在被摄取入胞后,可与Rab蛋白家族发生结合。②研究发现,SARS-CoV-2原始株的S-RBD、N、NSP7病毒蛋白均可刺激HEK-293T/bEnd.3/Beas-2b细胞产生巨胞饮作用。③在炎症细胞模型中,3个病毒蛋白均可增强细胞的巨胞饮作用。④经EIPA(75 μmol/L)或载带Rab5 siRNA的脂蛋白纳米药物载体处理后,2类细胞对S-RBD、N、NSP7病毒蛋白的摄取均有减少。结论·SARS-CoV-2原始株的S-RBD、N、NSP7病毒蛋白可上调多种细胞模型的巨胞饮水平,尤其是在合并炎症感染的情况下;同时,巨胞饮抑制剂/脂蛋白纳米药物载体均可抑制由上述病毒蛋白上调的巨胞饮作用,继而减少病毒蛋白的入胞水平。

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    6. 海绵来源的smenospongine通过抑制非小细胞肺癌细胞中的EGFR-Akt-ABCG2信号通路抑制顺铂耐药
    廖雅慧, 刘丽云, 朱泓睿, 林厚文, 严继舟, 孙凡
    2022, 42 (8): 997-1007.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.08.004

    摘要81)   HTML10)    PDF(pc) (4930KB)(417)    收藏

    目的·研究海绵来源的倍半萜胺醌类化合物smenospongine(SME)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞A549及其顺铂耐药株A549/DDP的抗肿瘤活性及作用机制。方法·利用2种细胞(母本细胞A549和顺铂耐药细胞A549/DDP)作为研究模型,采用CCK-8实验检测2株细胞对一线化学治疗药物的半抑制浓度(half maximum inhibitory concentration,IC50)以验证A549/DDP多药耐药的情况;通过克隆形成实验检测SME对母本及耐药细胞增殖的影响,同时采用Transwell侵袭实验以及蛋白质印迹法(Western blotting)检测SME对A549/DDP上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的影响;应用Western blotting和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测2株细胞中受到SME调节的多药耐药基因的蛋白和mRNA表达水平,探讨其耐药分子机制;进一步采用Western blotting检测SME对多药耐药蛋白ATP结合盒蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette superfamily G member 2,ABCG2)上游蛋白的影响;通过流式细胞技术检测SME对母本细胞和顺铂耐药株细胞周期的影响,同时应用TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-end labeling)染色以及Western blotting检测SME对2株细胞凋亡的影响。结果·与母本细胞相比,顺铂耐药株A549/DDP细胞对顺铂表现出显著耐药性,同时对多种临床一线肺癌化学治疗药物表现出多药耐药的特征;SME显著抑制A549和A549/DDP的增殖、克隆形成,同时抑制耐药株的EMT;通过筛选多药耐药蛋白发现,SME显著下调ABCG2的蛋白以及mRNA表达;SME可抑制ABCG2上游的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase,Akt)信号通路,进而下调ABCG2,并上调FoxO1;SME诱导母本细胞和耐药株细胞周期阻滞在G0/G1期,同时诱导2株细胞凋亡。结论·SME作为抑制NSCLC耐药的新小分子化合物通过抑制EGFR-Akt信号通路,下调ABCG2蛋白、上调FoxO1蛋白,进而抑制A549和A549/DDP的细胞活力,抑制耐药株的EMT,最终促进细胞凋亡。

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    7. 上海交通大学医学院临床试验研究现状分析
    彭树涛, 仇晓春
    2022, 42 (8): 971-979.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.08.001

    摘要84)   HTML223)    PDF(pc) (4893KB)(412)    收藏

    目的·分析2012—2021年上海交通大学医学院(简称上海交大医学院)注册的临床试验与发表的临床研究论文的学科分布、研究团队、多中心合作及其趋势特征。方法·在Dimensions及中国、美国临床试验注册平台重点检索上海交大医学院及附属医院2012—2021年注册开展的临床试验信息,按健康研究分类系统(Health Research Classification System,HRCS)和国际放射防护委员会(International Commission on Radiological Protection,ICRP)肿瘤分类标准等对每条临床试验进行分类与标注。在PubMed数据库中检索同期以上海交大医学院为第一或通信作者所在机构发表的临床研究论文。采用EXCEL 2016和VOSviewer 1.6.18软件对以上信息进行聚类分析和可视化汇总。结果·2012—2021年全球新注册的临床试验中有中国研究人员参与的为54 652项,占全球总数的13.63%。北京、上海、广州是中国开展临床试验研究最多的3个城市。上海交大医学院这10年间每年新注册的与在研的临床试验项目数基本呈现逐年递增趋势,但2021年新注册的项目数略有下降。在所有上海交大医学院注册的3 970项临床试验中,44.4%在中国临床试验平台注册,55.0%在美国临床试验平台注册;85.5%的临床试验由研究者发起;肿瘤、心血管疾病、口腔与胃肠道疾病、精神疾病、代谢与内分泌疾病是该校临床试验研究的重点领域。其中,肺癌研究位列所有47种肿瘤研究的首位。第六人民医院、瑞金医院和仁济医院是临床试验注册数前3位的附属医院。以上海交大医学院为第一或通信作者所在机构的临床研究论文共计1 898篇(5.4%),研究主题主要分布在胃肠病、心脏病、肿瘤、放射、口腔正畸、糖尿病等领域。复旦大学各附属医院是其临床试验合作的主要机构。上海交大医学院在糖尿病、高血压以及骨科、放射科、肾脏科等领域已经形成核心研究团队。结论·上海交大学医学院临床试验研究学科优势明显,新兴学科潜力较大。多学科创新研究团队也已形成,多中心临床试验是临床试验的常态,并已在部分领域主持国际多中心临床试验合作。但相比全球与国内其他地区,2021年该校临床试验注册数有所下降,其原因有待进一步分析。

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    8. 不同月龄C57BL/6J小鼠耳蜗线粒体和NAD +水平比较
    冯宝怡, 董庭婷, 郑晓飞, 陶永, 吴皓
    2022, 42 (8): 980-986.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.08.002

    摘要95)   HTML30)    PDF(pc) (3503KB)(401)    收藏

    目的·研究不同月龄小鼠耳蜗中线粒体及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+)水平的变化,探索年龄相关性听力下降可能的机制。方法·分别选取1月龄、4月龄、8月龄及12月龄4组C57BL/6J雄性小鼠各10只,采用听性脑干反应(auditory brain response,ABR)和畸变产物耳声发射(distortion product otoacoustic emission,DPOAE)测定4组不同月龄小鼠听觉功能;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)比较4组不同月龄小鼠耳蜗中线粒体能量代谢相关基因Ndufb5(NADH:ubiquinone oxidoreductase subunit B5)、Sdha(succinate dehydrogenase complex flavoprotein subunit A)、Sdhc(succinate dehydrogenase complex subunit C)和Atp5b(ATP synthase,H+ transporting mitochondrial F1 complex,beta subunit)的mRNA表达水平;通过免疫荧光染色分别观察1月龄和12月龄小鼠耳蜗毛细胞中的线粒体数量变化;通过透射电子显微镜(电镜)观察1月龄和12月龄小鼠耳蜗中内毛细胞、外毛细胞、螺旋神经节细胞及神经纤维中的线粒体形态结构;通过定量比色法检测并比较不同月龄小鼠耳蜗中的NAD+水平。结果·小鼠的ABR和DPOAE阈值呈现随月龄增长而升高的趋势,其中12月龄小鼠的ABR阈值在5.66~45.00 kHz的频率段较1月龄小鼠均显著升高(均P<0.01),DPOAE阈值在11.32~32.00 kHz的频率段较1月龄小鼠也显著升高(均P<0.01)。与1月龄小鼠相比,4、8、12月龄小鼠中4个线粒体功能相关基因(Ndufb5SdhaSdhcAtp5b)mRNA的表达水平呈现随月龄增长而下降的趋势,并在8月龄开始与1月龄的差异有统计学意义(均P<0.05)。免疫荧光染色结果显示12月龄小鼠耳蜗内毛细胞中的线粒体数量较1月龄明显减少。另外透射电镜在12月龄小鼠内毛细胞、螺旋神经节细胞及神经纤维中观察到空泡样变性的线粒体以及螺旋神经节细胞中出现较大的脂褐素。小鼠内耳NAD+水平呈现随月龄增长而下降的趋势,8月龄和12月龄小鼠NAD+水平较1月龄显著下降(均P<0.01)。结论·随月龄增长,C57BL/6J小鼠外周听觉关键细胞的线粒体功能下降、结构异常,耳蜗NAD+水平下降,这与小鼠听力阈值随着月龄增长而下降的表现一致。

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    9. 沉默信息调节因子1在新生儿坏死性小肠结肠炎肠组织中的表达特点
    陈锐, 赵云, 赵晓霞, 马东, 韩一江, 赖登明, 顾伟忠, 钭金法
    2021, 41 (9): 1154-1161.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.004

    摘要289)      PDF(pc) (4204KB)(371)    收藏

    目的·探究沉默信息调节因子1(silent information regulator transcript 1,SIRT1)在坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)肠管组织中的表达特点,初步探讨SIRT1对NEC的影响及可能机制。方法·纳入2018年6月—2020年10月经浙江大学医学院附属儿童医院新生儿外科手术治疗的NEC患儿80例,分为观察组和对照组。观察组组织样本为炎症坏死肠管;对照组为经保守治疗后发生肠狭窄,再次选择外科手术治疗的NEC患儿,组织样本为切缘肠管。收集2组患儿术前24 h内的血清中降钙素原(procalcitonin,PCT)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C reactive protein,hs-CRP)、细胞因子[白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)]以及性别、孕周等临床资料。采用免疫组织化学法检测2组患儿组织样本中的SIRT1、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)和Smad3蛋白的表达水平。体外培养SD雌性大鼠小肠上皮IEC-6细胞,采用干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)技术抑制IEC-6细胞中的SIRT1表达后,使用蛋白质印迹检查NF-κB表达变化,通过Cell Counting Kit-8(CCK8)和Transwell迁移实验检测SIRT1对IEC-6增殖和迁移能力的影响。结果·2组患儿的性别、孕周、出生体质量和分娩方式等一般资料差异无统计学意义。与对照组相比,观察组术前24 h内血清hs-CRP、PCT、IL-6、IL-10升高(均P=0.000)。与对照组NEC肠狭窄切缘肠管组织相比,观察组NEC坏死肠管组织中的SIRT1呈低表达,NF-κB呈过表达(均P=0.000)。Smad3蛋白和TGF-β1蛋白表达2组差异无统计学意义。NEC坏死肠管组织中SIRT1与NF-κB表达呈负相关(r=-0.592,P=0.000)。抑制SIRT1的mRNA和蛋白表达后,IEC-6细胞中的NF-κB相对表达量升高,细胞的增殖能力和迁移能力明显降低。结论·SIRT1可能通过抑制NF-κB的表达来降低NEC中炎症因子的表达,从而减轻NEC的进展。另一个可能的机制是SIRT1通过保护肠上皮细胞,减少其凋亡和迁移,从而减轻NEC的进展。

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    10. 腹腔镜诊治新生儿高位空肠闭锁/狭窄的效果观察
    赵宝红, 任红霞, 吴晓霞, 靳园园, 刘文跃, 赵亮, 张晖, 郭鑫, 孙雪
    2021, 41 (9): 1162-1168.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.005

    摘要220)      PDF(pc) (2950KB)(370)    收藏

    目的·探讨腹腔镜在新生儿高位空肠闭锁/狭窄疾病中的治疗效果。方法·回顾分析2009年1月—2019年12月于山西省儿童医院经手术治疗的90例新生儿高位空肠闭锁/狭窄(距屈氏韧带30 cm以内)的病例资料。根据是否采用腹腔镜手术将患儿分为腹腔镜组(n=66)和开腹组(n=24)。腹腔镜组中,27例距屈氏韧带10 cm以内的Ⅰ型闭锁/狭窄在腹腔镜下吻合完成手术,39例距屈氏韧带10~30 cm的闭锁/狭窄行单部位腹腔镜辅助下扩大戳孔提出体外手术。开腹组患儿均采用传统开腹手术治疗。对比2组患儿手术时间、术后开始经口喂养时间、术后全量经口喂养时间[喂养量达150 mL/(kg·d)]、住院天数、病死率及术后并发症发生率的差异。结果·2组患儿在性别、年龄、体质量、早产、低出生体质量、合并其他系统畸形、病理类型等一般资料间差异均无统计学意义。腹腔镜组手术时间(77.0±24.0)min与开腹组(82.0±24.0)min间差异无统计学意义。腹腔镜组术后开始经口喂养时间、术后全量经口喂养时间和住院天数[(13.3±7.2)d、(19.1±8.1)d和(22.1±8.5)d]均较开腹组[(17.2±7.8)d,(23.7±10.6)d和(27.0±11.8)d]短(均P<0.05)。腹腔镜组与开腹组在病死率(1/66 vs 2/24)及术后并发症发生率(7/66 vs 6/24)的差异均无统计学意义。结论·在新生儿高位空肠闭锁/狭窄诊治中,腹腔镜手术是一种安全、有效的方法。

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    11. Ⅲ型胆道闭锁患儿肝门肠吻合术预后相关因素分析
    吉耿锋, 张志波
    2021, 41 (9): 1142-1146.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.002

    摘要228)      PDF(pc) (1150KB)(361)    收藏

    目的·探讨影响Ⅲ型胆道闭锁患儿肝门肠吻合术(又称为Kasai手术)术后黄疸清除及自体肝生存的相关因素。方法·回顾性分析2012年1月—2018年1月中国医科大学附属盛京医院收治的Ⅲ型胆道闭锁并行Kasai手术患儿的临床资料,根据患儿预后情况将其分为黄疸清除组(JC组,又分为早期退黄组和晚期退黄组)和黄疸未清除组(JOC组),或自体肝生存组和非自体肝生存组(肝移植/死亡)。应用t检验/U检验、χ2检验、Kaplan-Meier生存分析、多因素Cox回归分析等统计学方法,分析影响预后的相关因素。结果·共有96例临床资料及随访资料完整的Ⅲ型胆道闭锁患儿被纳入研究,其中男、女各48例;平均手术日龄为(62.1±18.9)d,平均随访时间为(16.2±20.3)个月。61例(63.5%)患儿在术后6个月内直接胆红素降至正常水平(JC组);与JOC组相比,JC组术前间接胆红素水平较高,而白蛋白水平较低(均P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,术后3、6、12、24个月所有患儿自体肝生存率分别为92.3%、70.9%、57.8%和55.8%;JC组的自体肝生存率显著高于JOC组(P=0.000),早期退黄组显著高于晚期退黄组(P=0.001)。多因素Cox回归分析结果发现,影响自体肝生存率的相关因素为性别及黄疸是否清除,男性[P=0.049,RR=2.163(95%CI 1.076~4.797)]、黄疸消退[P=0.001,RR=11.488(95%CI 2.726~48.415)]患儿的2年自体肝生存率较高。结论·术前间接胆红素水平和白蛋白水平可能与Ⅲ型胆道闭锁并行Kasai手术患儿术后黄疸清除有关;男性、黄疸消退是这类患儿2年自体肝生存的保护因素。

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    12. 改良危重症营养风险评分在老年危重症患者中的应用
    陆雪梅, 陈兰
    2022, 42 (1): 16-20.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.003

    摘要247)   HTML20)    PDF(pc) (859KB)(334)    收藏

    目的·验证改良危重症营养风险(modified Nutrition Risk in the Critically Ill,mNUTRIC)评分在老年危重症患者营养风险评估及预测其临床预后中的作用。方法·使用mNUTRIC评分评估2020年10月—2021年2月入住上海交通大学附属第一人民医院综合重症监护室(intensive care unit,ICU)的老年患者,根据评估结果将患者分为高营养风险组和低营养风险组。对2组患者进行观察记录至转科、出院或死亡,分析不同营养风险患者的营养支持情况(包括营养支持方式、支持开始时间及能量供给达标情况),比较不同营养风险患者的ICU停留时间、机械通气时间和28 d病死率。结果·老年危重症患者中,高营养风险者占51.8%。2组患者的营养支持方式差异无统计学意义。低营养风险组的能量达标率为73.3%,高营养风险组的能量达标率为58.8%,差异无统计学意义。低营养风险组能量达标所用时间为5.00(1.00,8.00)d,高营养风险组能量达标所用时间为9.00(3.00,12.50)d,差异无统计学意义。高营养风险组的机械通气时间为5.00(1.50,12.50)d,长于低营养风险组(P=0.018);高营养风险组28 d病死率47.7%,高于低营养风险组(P=0.001)。2组患者的ICU停留时间差异无统计学意义。结论·在老年危重症患者中可以使用mNUTRIC评分来进行营养风险的评估,评估结果可用于预测老年危重症患者的临床预后。建议根据评估结果对于不同营养风险的老年危重症患者进行临床分层营养管理,通过个性化的营养支持方案等方式,使得老年危重症患者从营养支持中获益,并可能改善患者的临床预后。

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    13. 口服益生菌对肝部分切除术患者术后感染和肝功能恢复的影响
    吴懿, 方芳, 黄浩, 陈瑛
    2022, 42 (1): 9-15.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.002

    摘要249)   HTML23)    PDF(pc) (942KB)(334)    收藏

    目的·探讨口服益生菌对肝部分切除术患者术后感染和肝功能恢复的影响。方法·入组上海交通大学附属第一人民医院165例行肝部分切除术的患者,应用随机数字表将患者分为传统机械性肠道准备组(MBP组,n=55)、无肠道准备组(NBP组,n=55)和益生菌肠道准备组(PBP组,n=55)。收集患者临床资料,包括基本信息,术后发热情况,排气排便时间,术后第1、3、5日感染指标和肝功能指标,并进行组间比较。结果·3组患者基本资料比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后第5日,PBP组患者白细胞计数显著低于MBP组(P=0.012)和NBP组(P=0.029)。术后第3日、第5日PBP组谷丙转氨酶水平较MBP组和NBP组显著降低(术后第3日:P=0.040,P=0.036。术后第5日:P=0.002,P=0.019)。结论·口服益生菌肠道准备有助于减轻肝部分切除术后感染,加快肝功能恢复。

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    14. miR-146a-5p表达与新生儿坏死性小肠结肠炎肠道损伤严重程度的相关研究
    陈江龙, 陈砼, 吕志宝, 王雪莉, 盛庆丰
    2021, 41 (9): 1147-1153.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.003

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    目的·检测新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)肠道miR-146a-5p表达水平,并分析其与NEC患儿肠道损伤严重程度的相关性。方法·收集2014年1月—2018年12月于上海交通大学附属儿童医院普外科就诊的NEC和肠闭锁(intestinal atresia,IA)患儿的临床资料。根据肠道组织标本的取材部位,将NEC患儿分为NEC炎症组与NEC未受影响组,以IA患儿的肠道组织标本为对照组(即IA组)。选取5~7日龄C57BL/6J新生小鼠,根据随机数字表将其分为NEC造模组与对照组;前者行造模处理,后者不做处理。处死后,取小鼠的末端回肠组织标本。分别对各组新生小鼠和患儿的组织标本行苏木精-伊红染色,并对小鼠标本行组织病理评级。采用原位杂交检测各组新生小鼠与患儿肠道中miR-146a-5p的表达水平,并分别比较2组新生小鼠、2组患儿的表达差异。对NEC患儿肠道中miR-146a-5p表达水平与组织病理评级行相关性分析,并比较miR-146a-5p高表达(阳性细胞个数≥100个)与低表达(阳性细胞个数<100个)患儿在不同临床资料中的分布情况。结果·①与对照组相比,NEC造模组小鼠的末端回肠组织的病理评级较高,且miR-146a-5p表达水平亦较高(P=0.000)。②与IA组和NEC未受影响组相比,NEC炎症组患儿肠道组织中miR-146a-5p表达水平较高(均P=0.000);NEC患儿miR-146a-5p表达水平与肠道组织病理评级呈正相关(P=0.015,r=0.578)。③与miR-146a-5p低表达相比,miR-146a-5p高表达患儿中肠道切除长度≥5 cm者较多(P=0.005)。结论·miR-146a-5p高表达与NEC肠道损伤严重程度相关,提示miR-146a-5p参与了NEC的发生与发展过程。

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    15. 乳腺癌类器官共培养技术的建立和优化
    周天浩, 辛肇晨, 杜少倩, 曹源, 许静轩, 劳曾红, 王红霞
    2021, 41 (8): 1017-1024.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.08.004

    摘要541)   HTML205)    PDF(pc) (4693KB)(321)    收藏

    目的·改进乳腺癌类器官培养传代方法,建立富集肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)的共培养体系。方法·采用不同类型胶原酶(Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅳ型)处理5例乳腺癌新鲜肿瘤组织,通过细胞计数法计数组织消化后的细胞数量,用流式细胞仪分析细胞活性;采用含有不同含量成纤维细胞生长因子7(fibroblast growth factor 7,FGF7)、FGF10以及表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)的培养基对乳腺癌原发灶单细胞进行三维培养,对比观察不同细胞因子含量对类器官培养成功率和状态的影响;采用不同离心速度,对比类器官传代方法优劣,简化传代步骤。建立原代CAFs与类器官共培养体系,CCK8实验研究CAFs对类器官生长的影响,光学显微镜下观察类器官的形态变化。结果·相比于Ⅰ型胶原酶和Ⅲ型胶原酶,Ⅳ型胶原酶消化乳腺癌组织可得到较高的细胞回收效率(P=0.045,P=0.017),并保持较高的细胞活性(P=0.005,P=0.048);优化类器官培养基成分(不添加FGF7和FGF10,添加低浓度EGF),并提高离心转速至900×g,可得到更经济、有效、快速的类器官培养传代方法。相比单独培养的类器官,CAFs与类器官共培养,进一步提高类器官体外生长速度(P<0.05),增加类器官形态的异质性。结论·优化后的类器官培养体系可显著增加乳腺癌类器官培养成功率,简化培养步骤并降低培养成本。原代CAFs和类器官共培养体系的建立为研究乳腺癌异质性和肿瘤微环境提供了良好的体外模型。

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    16. 孕妇及胎儿超声参数评估胎儿体质量的研究进展
    王一飞, 吴琰婷, 黄荷凤
    2021, 41 (3): 366-370.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.03.014

    摘要707)   HTML8)    PDF(pc) (1084KB)(315)    收藏

    分娩前使用孕妇及胎儿各项参数计算胎儿估计体质量(estimated fetal weight,EFW)对正确评估胎儿宫内生长发育和妊娠结局有重要的作用。计算EFW的方法种类繁多。使用孕妇参数估计EFW的预测准确率取决于医师的经验和测量的规范性。以产前胎儿超声检查参数为主的Hadlock公式等评估方法是目前临床应用较广泛的方法,但误差仍较大。而通过三维超声和核磁共振对胎儿体积的计算虽可更准确地计算EFW,但受到时间和经济因素的限制,不能被广泛地应用。基于神经网络分析的大数据建模,预测符合率优于传统超声检测,有望成为更好的EFW评估方法。综上,精确评估EFW,并应用于产科临床仍是未来的重大挑战。

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    17. 非体外循环冠状动脉搭桥患者术前糖化血红蛋白水平与术后谵妄的关系
    何烨, 方芳
    2022, 42 (1): 21-27.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.004

    摘要218)   HTML19)    PDF(pc) (1071KB)(307)    收藏

    目的·研究非体外循环冠状动脉搭桥(off-pump coronary artery bypass surgery,OPCAB)患者术前糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)水平与术后谵妄的关系,为进一步实施干预提供参考依据。方法·采用前瞻性研究,纳入上海交通大学医学院附属瑞金医院心脏外科收治的OPCAB手术患者364例,通过一般资料问卷、简易智力状态评估量表收集资料,通过ICU意识模糊评估量表、中文版3D-CAM谵妄量表评估术后谵妄。采用单因素分析,筛选出P<0.05的谵妄的危险因素后,再进行多因素Logistic回归分析。利用广义相加模型观察HbA1c水平与术后谵妄发生率的动态变化,并绘制受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC curve),明确其界值。结果·OPCAB患者术后谵妄的影响因素有年龄、饮酒史、糖尿病、贫血、周围血管疾病、术前心功能分级、左室射血分数、白蛋白、HbA1c、术中输血、酸碱失衡、电解质紊乱。通过广义相加模型和多因素Logistic回归分析,结果显示术前HbA1c值越高,OPCAB患者术后谵妄的发生率越高。通过ROC曲线分析,确定当HbA1c值>6.45%时,OPCAB术后谵妄发生的风险随之增高。结论·对于接受OPCAB手术的患者,HbA1c值是术后谵妄的独立危险因素;随着HbA1c值的升高,谵妄的发生率也逐渐增高。提示OPCAB患者术前HbA1c值应尽量维持在正常水平。

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    18. 深静脉血栓形成机械预防知信行问卷的编制及信度和效度检验
    韩春红, 王洁, 洪洋, 童亚慧
    2022, 42 (1): 28-35.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.005

    摘要194)   HTML19)    PDF(pc) (950KB)(303)    收藏

    目的·编制适用于我国骨科护士的深静脉血栓形成机械预防知信行问卷,并检验其信度和效度。方法·在文献回顾的基础上,结合骨科疾病和骨科护士的工作特点,编制深静脉血栓形成机械预防知信行问卷初稿。2020年1月,通过2轮专家函询对初稿条目进行论证和修改,形成深静脉血栓形成机械预防知信行问卷测试版。2020年3月,在江苏省13个市36家医疗单位620名骨科护士中进行测试。采用临界比值法和同质性检验进行项目分析;从内部一致性信度、折半信度、重测信度的角度进行信度分析;从内容效度和结构效度两方面进行效度分析。结果·深静脉血栓形成机械预防知信行问卷初稿包含37个条目,经过第1轮专家咨询修改4个条目,增添7个条目;经过第2轮专家咨询,形成包含44个条目的问卷测试版。该研究共发放问卷620份,有效回收率为96.77%。临界比值法示,反映高分组和低分组独立样本t检验结果的条目决断值t介于5.89~20.31,且差异有统计学意义(均P<0.05);同质性检验示,反映各条目得分与量表总分相关性的Pearson相关系数r介于0.49~0.79,且差异有统计学意义(均P<0.05);故经项目分析,保留44个条目。反映总问卷内部一致性的Cronbach's α系数为0.893,反映折半信度的Spearman-Brown系数为0.794,反映重测信度的组内相关系数为0.909。反映内容效度的问卷水平内容效度指数为0.926,条目水平内容效度指数为0.833~1。反映结构效度的取样适切性量数KMO值为0.883,Bartlett's球形检验的χ2值为12 560.176(df=666,P<0.05),表示问卷适合进行探索性因子分析,且根据因子负荷绝对值共删除7个条目,最终剩余37个条目;提取7个特征值>1的公因子,分别命名为机械预防的行为、机械预防的风险认知、机械预防的适应证认知、机械预防的禁忌证认知、机械预防的概念认知、机械预防的应对和机械预防的健康教育认知,累计方差贡献率为61.992%。结论·该研究编制的深静脉血栓形成机械预防知信行问卷信度和效度较好,可作为研究骨科护士机械预防态度、认知和行为的调查工具。

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    19. 硫酸胆固醇的生理功能及其在相关疾病中的作用
    蒋悦庭, 倪佳英, 郭沈睿, 李菡, 庄雨佳, 王锋
    2021, 41 (3): 371-375.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.03.015

    摘要884)   HTML12)    PDF(pc) (1069KB)(302)    收藏

    硫酸胆固醇(cholesterol sulfate,CS)是人体中重要的类固醇硫酸酯,由胞浆磺基转移酶(sulfotransferase,SULT)2B1b催化合成,发挥多种重要的生理作用。其广泛分布于人体,如皮肤、肾上腺、肝脏、肺、脑和子宫内膜等。CS在表皮中参与角质层角化套膜的形成和角质细胞分化标志物的表达,从而调节表皮脱屑和屏障功能;在免疫系统胸腺细胞形成的过程中CS抑制T细胞受体信号的传递,并且CS/胆固醇比例直接影响T细胞的胸腺选择,由此参与成熟T细胞受体组库的塑造;CS通过减少氧化应激、维持线粒体膜稳定和增加能量储备调节脑代谢和发挥神经保护效应。此外,CS还通过调节功能蛋白的活性参与多种疾病的发生发展过程。催化CS脱硫的类固醇硫酸酯酶(steroid sulfatase,STS)基因发生缺失突变直接导致了X连锁鱼鳞病(X-linked ichthyosis,XLI)的发生;CS通过促进β淀粉样蛋白(amyloid β-protein,Aβ)聚集参与阿尔茨海默病的发生发展;CS通过抑制肝细胞核因子4α(hepatocyte nuclear factor 4α,HNF4α)的活化来调控糖异生,其衍生物有望用于治疗2型糖尿病;CS在多种癌症中均有异常表达,可与基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)相互作用诱导癌细胞的聚集和转移。现阶段的研究重点是在病理生理条件下揭示其具体的分子机制,并由此设计可行的临床治疗方案。

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    20. 人工智能技术在骨肌系统影像学方面的应用
    李小敏, 曲扬, 张少霆, 赵亮, 刘畅, 谢帅宁, 戴尅戎, 艾松涛
    2021, 41 (2): 262-266.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.02.022

    摘要674)   HTML4)    PDF(pc) (1072KB)(295)    收藏

    骨肌系统疾病种类繁多,影像学检查是疾病诊断的首要手段。合理选择图像后处理方法,可为疾病的诊断、手术治疗以及预后等提供可靠的评估依据。人工智能技术作为计算机科学发展的新阶段,能够高效、精准地对影像学图像进行预处理和分析,辅助医师诊断和治疗工作,将为骨肌系统影像学领域的发展带来新的机遇。该文就人工智能在骨肌系统疾病的影像诊断方面的应用现状和挑战展开综述,以期为开展相关研究的学者提供一定的参考。

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