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    1. 类胡萝卜素对母婴健康影响的研究进展
    吴轲 1,孙涵潇 2,蔡美琴 1
    2019, 39 (8): 929-.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2019.08.021

    摘要409)      PDF(pc) (7354KB)(1987)    收藏
    生命早期营养影响妊娠结局和子代终身健康。类胡萝卜素缺乏与先兆子痫、早产和宫内生长受限等不良妊娠结局的发生有关。类胡萝卜素在体内可以发挥抗氧化、炎症调节和免疫促进作用,并可以促进子代的视力、认知和呼吸系统健康。在类胡萝卜素中, α-胡萝卜素、 β-胡萝卜素和 β-隐黄质可以在体内转化生成维生素 A,其转化效率受到机体维生素 A营养状况的影响;叶黄素和玉米黄质高度富集于婴幼儿大脑和视网膜,与视敏度和认知功能的发育密切相关。母乳含有充足的叶黄素且其吸收率明显高于配方乳粉,人工喂养的婴儿尤其是早产儿需要注意补充叶黄素。该文综述了类胡萝卜素与不良妊娠结局及子代发育相关的功能研究进展,以及其在配方乳粉中的添加现状。
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    2. 肝门部胆管癌综合治疗的进展与争议
    陈炜, 刘颖斌
    2022, 42 (1): 1-8.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.001

    摘要76)   HTML13)    PDF(pc) (1076KB)(329)    收藏

    肝门部胆管癌早期诊断困难,预后较差,临床治疗存在诸多争议。目前,外科治疗仍是该病最主要的治疗方法。术前精准评估和充分准备,以及术中安全、有效、规范切除肿瘤是治疗成功的关键,以化学治疗(化疗)为主的综合治疗提高了患者的生存期。未来以肿瘤学理念为指导,包括手术、化疗、靶向、免疫和生物治疗多种模式的综合治疗是肝门部胆管癌治疗的发展趋势。

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    3. 靶向凝血因子FⅨa-FⅧa复合物结合位点的新型抗栓抗体
    孙天瑶, 蒋时枫, 徐沁, 刘俊岭, 党素英, 樊雪梅
    2021, 41 (9): 1133-1141.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.001

    摘要133)      PDF(pc) (6502KB)(383)    收藏

    目的·制备以内源性凝血途径中关键的凝血因子Ⅸa(coagulation factor Ⅸa,FⅨa)为靶点的单克隆抗体,并研究其抗栓功能及作用机制。方法·通过免疫小鼠、杂交瘤技术、单克隆抗体细胞表达纯化技术,制备高纯度的抗FⅨa单克隆抗体;通过酶联免疫吸附测定筛选与FⅨa具有高亲和力的单抗,利用活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)和凝血酶原时间(prothrombin time,PT)评估单抗的抗栓效果;然后利用发色底物法检测其对FⅨa酶活性的影响;采用计算机模拟蛋白-蛋白对接的方法预测抗体与FⅨa相互作用可能的结合位点,并通过竞争实验(间接通过发色底物法)对这一结合位点进行验证。结果·制备得到1种高亲和力抗FⅨa的单克隆抗体FⅨa-4;虽然它不影响PT和FⅨa的酶活性,但可显著延长APTT至88.8 s,是对照组(25.5 s)的3.5倍,并且具有浓度依赖性。蛋白-蛋白对接预测结果发现,FⅨa-4不直接与FⅨa的底物催化位点结合,而是占据了FⅨa和FⅧa的结合区域。竞争实验进一步验证了上述结果,FⅨa-4以剂量依赖的方式抑制FⅩa的生成,FⅨa-4的浓度达到400 pmol/L即可使FⅩa的生成几乎完全被抑制,而FⅧa可纠正抗体的抑制作用达到近50%。结论·获得抗FⅨa的单抗FⅨa-4;FⅨa-4与FⅧa竞争性结合FⅨa阻碍了FⅧa-FⅨa复合物形成,阻断FⅩ向FⅩa的转化,该抗体主要通过抑制内源性凝血途径发挥抗栓作用。

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    4. 改良危重症营养风险评分在老年危重症患者中的应用
    陆雪梅, 陈兰
    2022, 42 (1): 16-20.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.003

    摘要65)   HTML8)    PDF(pc) (859KB)(293)    收藏

    目的·验证改良危重症营养风险(modified Nutrition Risk in the Critically Ill,mNUTRIC)评分在老年危重症患者营养风险评估及预测其临床预后中的作用。方法·使用mNUTRIC评分评估2020年10月—2021年2月入住上海交通大学附属第一人民医院综合重症监护室(intensive care unit,ICU)的老年患者,根据评估结果将患者分为高营养风险组和低营养风险组。对2组患者进行观察记录至转科、出院或死亡,分析不同营养风险患者的营养支持情况(包括营养支持方式、支持开始时间及能量供给达标情况),比较不同营养风险患者的ICU停留时间、机械通气时间和28 d病死率。结果·老年危重症患者中,高营养风险者占51.8%。2组患者的营养支持方式差异无统计学意义。低营养风险组的能量达标率为73.3%,高营养风险组的能量达标率为58.8%,差异无统计学意义。低营养风险组能量达标所用时间为5.00(1.00,8.00)d,高营养风险组能量达标所用时间为9.00(3.00,12.50)d,差异无统计学意义。高营养风险组的机械通气时间为5.00(1.50,12.50)d,长于低营养风险组(P=0.018);高营养风险组28 d病死率47.7%,高于低营养风险组(P=0.001)。2组患者的ICU停留时间差异无统计学意义。结论·在老年危重症患者中可以使用mNUTRIC评分来进行营养风险的评估,评估结果可用于预测老年危重症患者的临床预后。建议根据评估结果对于不同营养风险的老年危重症患者进行临床分层营养管理,通过个性化的营养支持方案等方式,使得老年危重症患者从营养支持中获益,并可能改善患者的临床预后。

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    5. 口服益生菌对肝部分切除术患者术后感染和肝功能恢复的影响
    吴懿, 方芳, 黄浩, 陈瑛
    2022, 42 (1): 9-15.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.002

    摘要68)   HTML11)    PDF(pc) (942KB)(293)    收藏

    目的·探讨口服益生菌对肝部分切除术患者术后感染和肝功能恢复的影响。方法·入组上海交通大学附属第一人民医院165例行肝部分切除术的患者,应用随机数字表将患者分为传统机械性肠道准备组(MBP组,n=55)、无肠道准备组(NBP组,n=55)和益生菌肠道准备组(PBP组,n=55)。收集患者临床资料,包括基本信息,术后发热情况,排气排便时间,术后第1、3、5日感染指标和肝功能指标,并进行组间比较。结果·3组患者基本资料比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后第5日,PBP组患者白细胞计数显著低于MBP组(P=0.012)和NBP组(P=0.029)。术后第3日、第5日PBP组谷丙转氨酶水平较MBP组和NBP组显著降低(术后第3日:P=0.040,P=0.036。术后第5日:P=0.002,P=0.019)。结论·口服益生菌肠道准备有助于减轻肝部分切除术后感染,加快肝功能恢复。

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    6. Ⅲ型胆道闭锁患儿肝门肠吻合术预后相关因素分析
    吉耿锋, 张志波
    2021, 41 (9): 1142-1146.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.002

    摘要113)      PDF(pc) (1150KB)(321)    收藏

    目的·探讨影响Ⅲ型胆道闭锁患儿肝门肠吻合术(又称为Kasai手术)术后黄疸清除及自体肝生存的相关因素。方法·回顾性分析2012年1月—2018年1月中国医科大学附属盛京医院收治的Ⅲ型胆道闭锁并行Kasai手术患儿的临床资料,根据患儿预后情况将其分为黄疸清除组(JC组,又分为早期退黄组和晚期退黄组)和黄疸未清除组(JOC组),或自体肝生存组和非自体肝生存组(肝移植/死亡)。应用t检验/U检验、χ2检验、Kaplan-Meier生存分析、多因素Cox回归分析等统计学方法,分析影响预后的相关因素。结果·共有96例临床资料及随访资料完整的Ⅲ型胆道闭锁患儿被纳入研究,其中男、女各48例;平均手术日龄为(62.1±18.9)d,平均随访时间为(16.2±20.3)个月。61例(63.5%)患儿在术后6个月内直接胆红素降至正常水平(JC组);与JOC组相比,JC组术前间接胆红素水平较高,而白蛋白水平较低(均P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,术后3、6、12、24个月所有患儿自体肝生存率分别为92.3%、70.9%、57.8%和55.8%;JC组的自体肝生存率显著高于JOC组(P=0.000),早期退黄组显著高于晚期退黄组(P=0.001)。多因素Cox回归分析结果发现,影响自体肝生存率的相关因素为性别及黄疸是否清除,男性[P=0.049,RR=2.163(95%CI 1.076~4.797)]、黄疸消退[P=0.001,RR=11.488(95%CI 2.726~48.415)]患儿的2年自体肝生存率较高。结论·术前间接胆红素水平和白蛋白水平可能与Ⅲ型胆道闭锁并行Kasai手术患儿术后黄疸清除有关;男性、黄疸消退是这类患儿2年自体肝生存的保护因素。

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    7. 沉默信息调节因子1在新生儿坏死性小肠结肠炎肠组织中的表达特点
    陈锐, 赵云, 赵晓霞, 马东, 韩一江, 赖登明, 顾伟忠, 钭金法
    2021, 41 (9): 1154-1161.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.004

    摘要113)      PDF(pc) (4204KB)(325)    收藏

    目的·探究沉默信息调节因子1(silent information regulator transcript 1,SIRT1)在坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)肠管组织中的表达特点,初步探讨SIRT1对NEC的影响及可能机制。方法·纳入2018年6月—2020年10月经浙江大学医学院附属儿童医院新生儿外科手术治疗的NEC患儿80例,分为观察组和对照组。观察组组织样本为炎症坏死肠管;对照组为经保守治疗后发生肠狭窄,再次选择外科手术治疗的NEC患儿,组织样本为切缘肠管。收集2组患儿术前24 h内的血清中降钙素原(procalcitonin,PCT)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C reactive protein,hs-CRP)、细胞因子[白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)]以及性别、孕周等临床资料。采用免疫组织化学法检测2组患儿组织样本中的SIRT1、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)和Smad3蛋白的表达水平。体外培养SD雌性大鼠小肠上皮IEC-6细胞,采用干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)技术抑制IEC-6细胞中的SIRT1表达后,使用蛋白质印迹检查NF-κB表达变化,通过Cell Counting Kit-8(CCK8)和Transwell迁移实验检测SIRT1对IEC-6增殖和迁移能力的影响。结果·2组患儿的性别、孕周、出生体质量和分娩方式等一般资料差异无统计学意义。与对照组相比,观察组术前24 h内血清hs-CRP、PCT、IL-6、IL-10升高(均P=0.000)。与对照组NEC肠狭窄切缘肠管组织相比,观察组NEC坏死肠管组织中的SIRT1呈低表达,NF-κB呈过表达(均P=0.000)。Smad3蛋白和TGF-β1蛋白表达2组差异无统计学意义。NEC坏死肠管组织中SIRT1与NF-κB表达呈负相关(r=-0.592,P=0.000)。抑制SIRT1的mRNA和蛋白表达后,IEC-6细胞中的NF-κB相对表达量升高,细胞的增殖能力和迁移能力明显降低。结论·SIRT1可能通过抑制NF-κB的表达来降低NEC中炎症因子的表达,从而减轻NEC的进展。另一个可能的机制是SIRT1通过保护肠上皮细胞,减少其凋亡和迁移,从而减轻NEC的进展。

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    8. 腹腔镜诊治新生儿高位空肠闭锁/狭窄的效果观察
    赵宝红, 任红霞, 吴晓霞, 靳园园, 刘文跃, 赵亮, 张晖, 郭鑫, 孙雪
    2021, 41 (9): 1162-1168.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.005

    摘要91)      PDF(pc) (2950KB)(320)    收藏

    目的·探讨腹腔镜在新生儿高位空肠闭锁/狭窄疾病中的治疗效果。方法·回顾分析2009年1月—2019年12月于山西省儿童医院经手术治疗的90例新生儿高位空肠闭锁/狭窄(距屈氏韧带30 cm以内)的病例资料。根据是否采用腹腔镜手术将患儿分为腹腔镜组(n=66)和开腹组(n=24)。腹腔镜组中,27例距屈氏韧带10 cm以内的Ⅰ型闭锁/狭窄在腹腔镜下吻合完成手术,39例距屈氏韧带10~30 cm的闭锁/狭窄行单部位腹腔镜辅助下扩大戳孔提出体外手术。开腹组患儿均采用传统开腹手术治疗。对比2组患儿手术时间、术后开始经口喂养时间、术后全量经口喂养时间[喂养量达150 mL/(kg·d)]、住院天数、病死率及术后并发症发生率的差异。结果·2组患儿在性别、年龄、体质量、早产、低出生体质量、合并其他系统畸形、病理类型等一般资料间差异均无统计学意义。腹腔镜组手术时间(77.0±24.0)min与开腹组(82.0±24.0)min间差异无统计学意义。腹腔镜组术后开始经口喂养时间、术后全量经口喂养时间和住院天数[(13.3±7.2)d、(19.1±8.1)d和(22.1±8.5)d]均较开腹组[(17.2±7.8)d,(23.7±10.6)d和(27.0±11.8)d]短(均P<0.05)。腹腔镜组与开腹组在病死率(1/66 vs 2/24)及术后并发症发生率(7/66 vs 6/24)的差异均无统计学意义。结论·在新生儿高位空肠闭锁/狭窄诊治中,腹腔镜手术是一种安全、有效的方法。

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    9. 非体外循环冠状动脉搭桥患者术前糖化血红蛋白水平与术后谵妄的关系
    何烨, 方芳
    2022, 42 (1): 21-27.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.004

    摘要60)   HTML8)    PDF(pc) (1071KB)(288)    收藏

    目的·研究非体外循环冠状动脉搭桥(off-pump coronary artery bypass surgery,OPCAB)患者术前糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)水平与术后谵妄的关系,为进一步实施干预提供参考依据。方法·采用前瞻性研究,纳入上海交通大学医学院附属瑞金医院心脏外科收治的OPCAB手术患者364例,通过一般资料问卷、简易智力状态评估量表收集资料,通过ICU意识模糊评估量表、中文版3D-CAM谵妄量表评估术后谵妄。采用单因素分析,筛选出P<0.05的谵妄的危险因素后,再进行多因素Logistic回归分析。利用广义相加模型观察HbA1c水平与术后谵妄发生率的动态变化,并绘制受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC curve),明确其界值。结果·OPCAB患者术后谵妄的影响因素有年龄、饮酒史、糖尿病、贫血、周围血管疾病、术前心功能分级、左室射血分数、白蛋白、HbA1c、术中输血、酸碱失衡、电解质紊乱。通过广义相加模型和多因素Logistic回归分析,结果显示术前HbA1c值越高,OPCAB患者术后谵妄的发生率越高。通过ROC曲线分析,确定当HbA1c值>6.45%时,OPCAB术后谵妄发生的风险随之增高。结论·对于接受OPCAB手术的患者,HbA1c值是术后谵妄的独立危险因素;随着HbA1c值的升高,谵妄的发生率也逐渐增高。提示OPCAB患者术前HbA1c值应尽量维持在正常水平。

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    10. miR-146a-5p表达与新生儿坏死性小肠结肠炎肠道损伤严重程度的相关研究
    陈江龙, 陈砼, 吕志宝, 王雪莉, 盛庆丰
    2021, 41 (9): 1147-1153.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2021.09.003

    摘要121)      PDF(pc) (5829KB)(291)    收藏

    目的·检测新生儿坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)肠道miR-146a-5p表达水平,并分析其与NEC患儿肠道损伤严重程度的相关性。方法·收集2014年1月—2018年12月于上海交通大学附属儿童医院普外科就诊的NEC和肠闭锁(intestinal atresia,IA)患儿的临床资料。根据肠道组织标本的取材部位,将NEC患儿分为NEC炎症组与NEC未受影响组,以IA患儿的肠道组织标本为对照组(即IA组)。选取5~7日龄C57BL/6J新生小鼠,根据随机数字表将其分为NEC造模组与对照组;前者行造模处理,后者不做处理。处死后,取小鼠的末端回肠组织标本。分别对各组新生小鼠和患儿的组织标本行苏木精-伊红染色,并对小鼠标本行组织病理评级。采用原位杂交检测各组新生小鼠与患儿肠道中miR-146a-5p的表达水平,并分别比较2组新生小鼠、2组患儿的表达差异。对NEC患儿肠道中miR-146a-5p表达水平与组织病理评级行相关性分析,并比较miR-146a-5p高表达(阳性细胞个数≥100个)与低表达(阳性细胞个数<100个)患儿在不同临床资料中的分布情况。结果·①与对照组相比,NEC造模组小鼠的末端回肠组织的病理评级较高,且miR-146a-5p表达水平亦较高(P=0.000)。②与IA组和NEC未受影响组相比,NEC炎症组患儿肠道组织中miR-146a-5p表达水平较高(均P=0.000);NEC患儿miR-146a-5p表达水平与肠道组织病理评级呈正相关(P=0.015,r=0.578)。③与miR-146a-5p低表达相比,miR-146a-5p高表达患儿中肠道切除长度≥5 cm者较多(P=0.005)。结论·miR-146a-5p高表达与NEC肠道损伤严重程度相关,提示miR-146a-5p参与了NEC的发生与发展过程。

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    11. 深静脉血栓形成机械预防知信行问卷的编制及信度和效度检验
    韩春红, 王洁, 洪洋, 童亚慧
    2022, 42 (1): 28-35.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.01.005

    摘要60)   HTML6)    PDF(pc) (950KB)(278)    收藏

    目的·编制适用于我国骨科护士的深静脉血栓形成机械预防知信行问卷,并检验其信度和效度。方法·在文献回顾的基础上,结合骨科疾病和骨科护士的工作特点,编制深静脉血栓形成机械预防知信行问卷初稿。2020年1月,通过2轮专家函询对初稿条目进行论证和修改,形成深静脉血栓形成机械预防知信行问卷测试版。2020年3月,在江苏省13个市36家医疗单位620名骨科护士中进行测试。采用临界比值法和同质性检验进行项目分析;从内部一致性信度、折半信度、重测信度的角度进行信度分析;从内容效度和结构效度两方面进行效度分析。结果·深静脉血栓形成机械预防知信行问卷初稿包含37个条目,经过第1轮专家咨询修改4个条目,增添7个条目;经过第2轮专家咨询,形成包含44个条目的问卷测试版。该研究共发放问卷620份,有效回收率为96.77%。临界比值法示,反映高分组和低分组独立样本t检验结果的条目决断值t介于5.89~20.31,且差异有统计学意义(均P<0.05);同质性检验示,反映各条目得分与量表总分相关性的Pearson相关系数r介于0.49~0.79,且差异有统计学意义(均P<0.05);故经项目分析,保留44个条目。反映总问卷内部一致性的Cronbach's α系数为0.893,反映折半信度的Spearman-Brown系数为0.794,反映重测信度的组内相关系数为0.909。反映内容效度的问卷水平内容效度指数为0.926,条目水平内容效度指数为0.833~1。反映结构效度的取样适切性量数KMO值为0.883,Bartlett's球形检验的χ2值为12 560.176(df=666,P<0.05),表示问卷适合进行探索性因子分析,且根据因子负荷绝对值共删除7个条目,最终剩余37个条目;提取7个特征值>1的公因子,分别命名为机械预防的行为、机械预防的风险认知、机械预防的适应证认知、机械预防的禁忌证认知、机械预防的概念认知、机械预防的应对和机械预防的健康教育认知,累计方差贡献率为61.992%。结论·该研究编制的深静脉血栓形成机械预防知信行问卷信度和效度较好,可作为研究骨科护士机械预防态度、认知和行为的调查工具。

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    12. 蛋白质精氨酸甲基转移酶在肿瘤中的作用及机制研究进展
    文君,闵雪洁,赵丽,赵小平
    2017, 37 (6): 842-.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2017.06.022

    摘要1211)      PDF(pc) (7473KB)(1918)    收藏

    蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT) 能甲基化多种蛋白,包括组蛋白和非组蛋白,影响多种细胞过程,如转录、RNA 剪接、 DNA 修复、细胞周期的控制等。PRMT 的活性受多种调节机制影响,它的异常表达在疾病的发生发展中起重要作用,尤其是肿瘤, 如乳腺癌、白血病等。PRMT 在肿瘤诊断或治疗中有着独特的价值。随着 PRMT 甲基化机制的深入探索,目前 PRMT 选择性抑制剂 的研究已取得一定进展,PRMT 特异性抑制剂有望成为治疗肿瘤的精准靶向药物。

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    13. 山莨菪碱4个异构体的分离及其抗胆碱活性比较
    孙 凯, 谢一凡, 崔永耀, 等
    2011, 31 (4): 406-.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2011.04.005

    摘要1816)      PDF(pc) (5636KB)(1788)    收藏

    目的 探讨山莨菪碱立体异构与生物活性的关系。方法 采用MDS-5型反相制备色谱柱直接分离山莨菪碱得到外消旋体Ⅰ和Ⅱ,用手性半制备高效液相色谱柱分离Ⅰ和Ⅱ得到山莨菪碱的4个单一异构体,通过抗卡巴胆碱致大鼠气管收缩效应实验考察4个异构体的抗胆碱活性。结果 由1H NMR谱和比旋光度值确定了山莨菪碱4个异构体的绝对构型,不同的立体构型对卡巴胆碱诱导的大鼠气管平滑肌收缩表现出不同程度的抑制作用,效应强度为(6S, 2-S)>(6S, 2-R)>(6R, 2-S)>(6R, 2-R)。结论 山莨菪碱莨菪烷母核上的S构型在抗胆碱活性上发挥更重要的作用。

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    15. 健康促进模式在老年慢性阻塞性肺疾病患者健康教育中的应用
    朱 萍, 李贤华
    2011, 31 (6): 713-.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2011.06.006

    摘要2140)      PDF(pc) (4409KB)(2089)    收藏

    目的 探讨健康促进模式(HPM)在老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中的应用及其对患者治疗依从性的影响。方法 采用HPM对48例老年COPD患者进行系统、全面的健康教育;采用患者健康促进行为访谈提纲对患者进行个案分析;采用患者调查表评估患者的治疗依从性和入院率,并于1年后比较干预前后患者的入院率和治疗依从性。结果 健康促进行为评估显示:48例患者均表示已经知道健康促进行为的益处,接受散步这一运动形式,但仍有19例未戒烟,2例来自重要他人的支持缺如;就诊太远是患者抱怨的主要原因,而嫌麻烦、认为没有必要来等主观因素也较明显,另有3例因工作原因可能影响其采取健康促进行为;全部患者能明确健康行为计划。通过1年健康教育,48例患者在遵医嘱服药、定期门诊随访和遵医嘱理疗三个方面的治疗依从性均较干预前显著提高(P<0.05),1年内入院人数明显降低(P<0.05)。结论 HPM作为原因模式可以协助临床护理人员分析影响患者健康促进行为的决定因素,有利于患者和护士共同制订健康行为计划,提高患者的自我管理意识和能力,明显改善患者的治疗依从性,降低患者入院率。

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    16. 血根碱通过上调m 6A甲基转移酶14对胃癌细胞增殖和侵袭的抑制作用
    陈鸣, 张靖
    2022, 42 (2): 135-141.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.02.001

    摘要113)   HTML365)    PDF(pc) (2415KB)(238)    收藏

    目的·探讨血根碱(sanguinarine,SAG)对胃癌细胞MGC-803和AGS增殖和侵袭的影响,及其作用机制与N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基转移酶(methyltransferase 14,METTL14)的关系。方法·利用不同浓度SAG(0、10、20 μmol/L)处理胃癌细胞系MGC-803和AGS,48 h后通过定量PCR和Western blotting检测SAG对METTL14表达的影响。然后用METTL14的小干扰RNA(si-METTL14)慢病毒载体或其空载对照si-NC慢病毒载体转染上述2个胃癌细胞系,再以10 μmol/L SAG或PBS处理48 h,将细胞分为si-METTL14+SAG组、si-NC+SAG组和si-NC+PBS组。定量PCR和Western blotting验证si-METTL14转染后METTL14在胃癌细胞的表达水平。噻唑蓝(MTT)细胞增殖实验、细胞克隆形成实验及Transwell侵袭实验分别观察3组细胞的增殖水平、克隆形成数量及侵袭潜能。2组数据间比较采用独立样本t检验,2组以上数据间比较采用单因素方差分析。结果·与对照组(0 μmol/L)比较,10 μmol/L、20 μmol/L SAG在2种胃癌细胞中均可上调METTL14的mRNA和蛋白表达水平(均P<0.05),且呈一定的浓度依赖性。定量PCR和Western blotting结果证实,转染si-METTL14METTL14在胃癌细胞的表达水平显著降低。MTT细胞增殖实验结果显示,si-NC+SAG组较si-NC+PBS组细胞增殖率显著降低(均P=0.000);克隆形成实验结果显示,si-NC+SAG组较si-NC+PBS组细胞克隆数显著减少(均P<0.01);Transwell侵袭实验结果显示,si-NC+SAG组较si-NC+PBS组穿过基底胶(Matrigel)的细胞数量显著减少(均P<0.01)。而si-METTL14可以部分逆转SAG的上述对胃癌细胞的抑制作用。结论·SAG可以抑制胃癌细胞的增殖活性、克隆形成及侵袭潜能,这些作用可能是通过上调METTL14表达水平实现的。

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    17. Pcsk9基因干扰对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病合并动脉粥样硬化的影响
    张晓文, 王祎, 张婵, 张迪, 贠航, 黄笛
    2022, 42 (2): 150-157.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.02.003

    摘要84)   HTML239)    PDF(pc) (2405KB)(184)    收藏

    目的·探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin 9,Pcsk9)基因干扰对高脂诱导的大鼠非酒精性脂肪性肝病及动脉粥样硬化损伤的影响。方法·构建非酒精性脂肪性肝病SD大鼠模型。40只大鼠随机分为4组:对照组、模型(high fat)组、shRNA-阴性对照(negative control,NC)干扰模型(high fat+shRNA-NC)组及Pcsk9-shRNA干扰模型(high fat+Pcsk9-shRNA)组。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Pcsk9基因干扰效率。放射免疫法测定空腹血清胰岛素。全自动生化分析仪检测大鼠血脂指标。苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H-E染色)观察肝脏组织及主动脉组织损伤。TUNEL染色检测肝脏组织细胞凋亡情况。酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平。蛋白印迹法检测PCSK9、Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)P65及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的表达。结果·与对照组比较,模型组的肥胖指数和胰岛素水平显著升高(均P=0.000);肝脏细胞凋亡率显著升高(P=0.000);高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)水平显著降低,而低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和三酰甘油(triacylglycerol,TAG)水平显著升高(均P=0.000);炎症因子IL-1β、IL-6、iNOS水平均显著升高(均P=0.000);TLR4、NF-κB P65蛋白活化及TNF-α表达均显著升高(均P=0.000);肝脏组织和主动脉组织均呈现明显损伤。干扰Pcsk9基因表达后,与模型组比较,high fat+Pcsk9-shRNA 组肥胖指数和胰岛素水平显著降低(P=0.007,P=0.000);肝脏细胞凋亡率显著降低(P=0.000);HDL-C水平显著升高,而LDL-C、TC和TAG水平显著降低(均P=0.000);炎症因子IL-1β、IL-6及iNOS水平均显著降低(均P=0.000);TLR4、NF-κB P65蛋白活化及TNF-α表达均显著降低(均P=0.000);肝脏组织和主动脉组织病理损伤均得到改善。结论·干扰Pcsk9基因可减轻非酒精性脂肪性肝病合并动脉粥样硬化大鼠的肥胖指数、胰岛素水平、血脂指标及炎症反应,并抑制TLR4、NF-κB P65蛋白激活,进而改善大鼠肝脏及主动脉组织的损伤。

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    18. 肝硬化失代偿期患者并发肠梗阻的临床特点及相关危险因素分析
    宋亚兰,罗玲,张运芝
    2017, 37 (7): 993-.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2017.07.019

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    目的 · 分析肝硬化失代偿期患者并发肠梗阻的临床特点及危险因素。方法 · 收集 2010 年 3 月—2016 年 3 月收治的 1 783 例肝 硬化失代偿期患者的临床资料,筛选出并发肠梗阻患者128 例 (7.18%) 作为观察组,随机抽取未并发肠梗阻患者128 例作为对照组。 回顾性研究 2 组患者的临床资料,对临床特征进行对比分析,并采用 Logistic 回归分析相关危险因素。结果 · 肝硬化失代偿期患者并 发肠梗阻的临床症状隐匿,容易被漏诊或延迟诊断。观察组腹痛、腹胀、呕吐、停止排便排气、发热、自发性腹膜炎、腹水、电解质 紊乱的发生率显著高于对照组(P<0.05)。单因素分析结果显示:年龄、腹部手术史、白细胞计数、血清钾、血清钠、中性粒细胞百 分比、血清白蛋白为肝硬化失代偿期患者并发肠梗阻的危险因素。进一步的多因素回归分析结果显示:年龄、腹部手术史、白细胞计 数、血清钾、血清钠、中性粒细胞百分比、血清白蛋白是肝硬化失代偿期患者并发肠梗阻的独立危险因素。结论 · 年龄≥ 50 岁、有 腹部手术史、合并腹腔感染、低钾、低钠、低血清白蛋白的肝硬化失代偿期患者容易并发肠梗阻。
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    19. 三维电镜在脑干耳蜗核神经元形态学研究中的应用
    周佳蕾, 盛海斌, 王皓煜, 鲁岩, 王方方, 吴皓, 华云峰
    2022, 42 (2): 142-149.   DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2022.02.002

    摘要73)   HTML356)    PDF(pc) (3073KB)(172)    收藏

    目的·探索利用新型三维电子显微成像的方法对小鼠耳蜗核组织开展跨尺度神经解剖学和连接组学研究的可行性。方法·成年CBA/Ca小鼠(2月龄)脑组织经固定、解剖后,获取其中完整耳蜗核组织,并对该组织行重金属块染(还原性锇酸扩增法)、梯度乙醇和无水丙酮脱水、低黏度树脂包埋。通过X射线显微成像技术对耳蜗核组织进行断层扫描成像及三维重构,并对其染色效果进行评估,再根据听神经特异性分布对其目标区域进行定位。采用扫描电镜快速获得该组织的低分辨预扫图像,并与X射线显微成像进行比对,确定目标层面后使用连续切片扫描电镜采集目标区域的图像进行三维重构,并对该目标区域丛细胞及其表面的突触等超微结构进行追踪标记和重构分析。结果·成功制备了CBA/Ca小鼠完整耳蜗核的三维电镜样品。X射线显微成像采集并重构了具有细胞分辨率的耳蜗核立体结构,实现了耳蜗核各亚区的解剖定位。连续切片扫描电镜成功采集耳蜗核目标区域丛细胞的三维电镜数据,完成了丛细胞胞体上根蕾状突触和其他非听神经来源突触的追踪、标记和重构。三维电镜的数据分析显示,投射至目标丛细胞表面的听神经根蕾状突触有5个,共形成了348个突触活跃区,而非听神经来源的突触有97个。结论·利用锇酸块染、树脂包埋等方法对成年小鼠完整耳蜗核进行三维电镜样品的制备具有可行性。X射线显微成像可用于耳蜗核组织各亚区以及目标区域的快速和精确定位,且所采集的三维电镜数据可用于耳蜗核神经元的形态学以及突触连接方式的研究。

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