帅翰林1,史长征2,宋 泓1,陈丹亮1,朱小华1,罗 新1
SHUAI Han-lin1, SHI Chang-zheng2, SONG Hong1, CHEN Dan-liang1, ZHU Xiao-hua1, LUO Xin1
摘要:
目的 应用Effectene介导钆喷酸葡胺(Gd-DTPA)标记人脐带间充质干细胞(hUCMSCs),研究磁标记干细胞的生物学特性,探讨Gd-DTPA标记干细胞体外磁共振成像(MRI)规律。方法 组织块贴壁法分离纯化hUCMSCs,通过传代培养、扩增,鉴定细胞在体外的生物学特性。应用Effectene转染Gd-DTPA标记hUCMSCs,计数法检测Gd-DTPA标记干细胞的增殖能力,体外诱导其向成脂细胞和成骨细胞分化,观察GdDTPA影响hUCMSCs的生物学特性。应用1.5T临床应用型MRI系统,观察Gd-DTPA标记hUCMSCs的信号强度随细胞传代的变化规律,并探索MRI的最低细胞量。结果 应用组织块贴壁法接种2周后获得原代细胞,细胞呈长梭形,漩涡样生长,传2代后细胞形态更为均匀一致。流式细胞仪检测第3代细胞高表达CD29、CD44、CD90和CD105,不表达CD31、CD45、CD40和HLA-DR。体外定向诱导能分化为成脂细胞和成骨细胞。Effectene能成功转染Gd-DTPA进入干细胞,检测标记后的干细胞增殖能力未受到影响,并能在体外诱导向成骨细胞和成脂细胞分化。体外MRI扫描Gd-DTPA标记的干细胞在T1WI呈现高信号,体外持续示踪时间约12 d。结论 应用组织块贴壁法能有效分离纯化hUCMSCs。应用Effectene转染Gd-DTPA标记hUCMSCs进行体外MRI示踪是可行的。