上海交通大学学报(医学版) ›› 2019, Vol. 39 ›› Issue (9): 998-.doi: 10.3969/j.issn.1674-8115.2019.09.010
黄婷婷,李妍,张月蔓,周娜迎,范仁辉,李佩盈
HUANG Ting-ting, LI Yan, ZHANG Yue-man, ZHOU Na-ying, FAN Ren-hui, LI Pei-ying
摘要: 目的 ·评估双光子活体成像技术在缺血性脑卒中超早期血脑屏障( blood brain barrier,BBB)损伤的检测效果。方法 ·取 8~ 12周龄的清洁级 C57BL/6健康雄性小鼠 12只,随机分为假手术组( Sham组)和大脑中动脉阻塞( middle cerebral artery occlusion,MCAO)组,每组 6只。MCAO组小鼠采用微线栓阻塞大脑中动脉 60 min,引发小鼠发生缺血性脑卒中(即建立 MCAO模型);Sham组小鼠进行与 MCAO组小鼠相同的所有手术操作,但不置入微线栓。当 MCAO组小鼠缺血 60 min后,拔除线栓给予再灌注 30~ 60 min。随后, 2组小鼠均行静脉注射荧光素 488偶联的右旋糖苷( Alexa-Fluora-488 conjugated dextran)和罗丹明 6G(rhodamine 6G),分别标记血管和中性粒细胞,并采用四甲基罗丹明 -5-马来酰亚胺( tetramethylrhodamine-5-maleimide,TMR)检测 BBB的完整性。采用双光子荧光显微镜观察 MCAO组小鼠脑卒中前、后脑血管内外荧光强度的实时变化。结果 ·与发生脑卒中前相比,MCAO组小鼠脑卒中发生后 30~ 60 min即可观察到脑血管外 TMR荧光强度显著增强( P0.000),提示发生了示踪剂渗漏。与 Sham组相比, MCAO组小鼠发生脑卒中后中性粒细胞在血管内运动速度明显减慢( P0.000)。结论 ·双光子活体成像技术可对缺血性脑卒中超早期的 BBB损伤进行检测,为临床应用提供了一定的参考价值。
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