上海交通大学学报（医学版） ›› 2018, Vol. 38 ›› Issue (9): 1033-.doi: 10.3969/j.issn.1674-8115.2018.09.006
孙宝航行 1，鲁奕 1，王怡沁 1，周嘉乐 1，林梦璐 1，宋玮 2，姜萌 1，卜军 1
SUN Bao-hangxing1, LU Yi1, WANG Yi-qing1, ZHOU Jia-le1, LIN Meng-lu1, SONG Wei2, JIANG Meng1, BU Jun1
摘要： 目的 ·观察胚胎来源间充质干细胞（ placental derived mesenchymal stem cells，PMSCs）在人血小板裂解液（ human platelet lysate，HPL）、碱性成纤维细胞生长因子（ basic fibroblast growth factor，bFGF）及传统的胎牛血清（ fetal bovine serum，FBS）不同组合的培养基中的倍增数目及细胞性状，着重探索更合适的 PMSCs培养体系。方法 ·分离单个细胞来源 PMSCs，扩增后分别用 4种培养基孵育，分为 FBS组、FBS+bFGF组、HPL组以及 HPL+bFGF组。观察细胞形态及生长状态、细胞表型及多能分化。在 P1、 P2、P3、P4代进行计数。取 P4代细胞接种，分析集落形成单位的个数。结果 ·经鉴定， PMSCs具有间充质干细胞的生物特性。数量上， FBS+bFGF组在 P4代达到（ 1.12×107）个 /cm2，HPL组达到（ 1.24×107）个 /cm2（P>0.05），而 FBS组和 HPL+bFGF组则只有（5.58×106）个 /cm2和（8.56×106）个 /cm2。细胞形态上， FBS+bFGF组与 HPL组 P4代的 PMSCs均保持贴壁生长，但 HPL组细胞于 P5代无法贴壁生长。细胞集落数量上， P4代时， FBS+bFGF组为 51个 /孔，HPL为 52个 /孔（P>0.05）。细胞生物学特性上，FBS+bFGF组和 HPL组在 P4代时均能基本保有间充质干细胞的特性和多能分化的能力。结论 ·从细胞数量上来看， HPL组中的 P4代细胞数与目前常用的 FBS+bFGF培养基没有显著差异，且已达到临床治疗剂量需求；从细胞生物学特性上来看， HPL培养基与 FBS+bFGF培养基均能基本保持 PMSCs细胞特性和多能分化的能力。但由于 HPL培养基免疫原性低，因此更适合临床移植应用。然而，由于 HPL培养基无法维持 PMSCs生长至 5代以后，故无法用于大规模细胞扩增。HPL+bFGF在目前实验条件下并不具备优势。
中图分类号:
