余炜,朱超,茅伟伟,赵恩典,孟胜伟,蒋盛旦
YU Wei, ZHU Chao, MAO Wei-wei, ZHAO En-dian, MENG Sheng-wei, JIANG Sheng-dan
摘要:
目的 ·探讨神经肽P物质(SP)对转录因子RUNX2表达的调控及其对成骨细胞增殖能力的影响。方法 ·体外分离C57BL/6J小鼠颅骨来源的原代成骨细胞,通过转染siRNA沉默成骨细胞RUNX2基因的表达。将SP、Spantide(SP抑制剂)、L703606(NK-1受体抑制剂)以及RUNX2 siRNA进行配伍作用于成骨细胞,观察SP对成骨细胞RUNX2表达的调控及对成骨细胞增殖能力的影响。成骨细胞增殖活性的检测采用细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8法)。通过real-time PCR和Western blotting技术检测SP对RUNX2在mRNA和蛋白表达水平的调控。结果 · CCK-8法检测结果显示,浓度为10-12~10-6 mol/L的SP促进小鼠成骨细胞增殖,10-8 mol/L为其最佳浓度。10-8 mol/L SP作用于成骨细胞48 h后,转录因子RUNX2的mRNA和蛋白表达水平较对照组明显升高,Spantide和L703606抑制SP对RUNX2表达的诱导。RUNX2 siRNA降低成骨细胞基础增殖水平,同时也抑制了SP对成骨细胞的促增殖作用。结论 · SP通过与NK-1受体结合诱导转录因子RUNX2的表达,进而增强成骨细胞增殖能力。