›› 2013, Vol. 33 ›› Issue (3): 285-.doi: 10.3969/j.issn.1674-8115.2013.03.006
彭文标1, 刘春晓1, 谢 群2, 朱臂琳3, 吕腾荣3
PENG Wen-biao1, LIU Chun-xiao1, XIE Qun2, ZHU Bi-lin3, LÜ|Teng-rong3
摘要:
目的 富集兔毛囊干细胞构建组织工程化尿道,观察其对尿道缺损的修复效果。方法 应用机械分离与酶消化法分离培养兔毛囊细胞,体外原代培养扩增至3×106个,采用流式细胞仪富集毛囊干细胞,分选直径<10 μm的integrin-α6+/cd71-细胞,免疫荧光法检测细胞K19、p63和β1整合素表达。将毛囊干细胞接种于膀胱脱细胞基质支架材料上,构建组织工程化尿道,扫描电子显微镜观察细胞在支架上的分布状态。利用组织工程化尿道修复2.5 cm的兔尿道缺损,经尿道造影和组织学检查观察缺损修复效果。结果 免疫荧光法检测结果显示毛囊干细胞K19、p63、β1整合素表达阳性。扫描电子显微镜观察发现细胞与支架紧密贴附,细胞伸展适度且有基质分泌。组织学检查和免疫组织化学检测发现,毛囊干细胞形成复层上皮结构,AE1/AE3染色阳性。组织工程化尿道修复缺损后3个月,尿道造影显示尿道平滑通畅。结论 通过调整优化分选参数富集兔毛囊干细胞,构建的组织工程化尿道可用于修复兔尿道缺损。