王鱼璇,甘华
WANG Yu-xuan, GAN Hua
摘要:
目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)程序性坏死的影响。方法 体外合成RIP3 siRNA干扰片段,用siRNA-mate转染试剂转染NRK-52E细胞,Western blotting验证RIP3蛋白表达。MTT法测细胞存活率,流式细胞仪测细胞凋亡率,荧光酶标仪测细胞中的活性氧(ROS),实时定量PCR和Western blotting检测RIP1和RIP3 mRNA和蛋白的表达。结果 RIP3 siRNA转染NRK-52E后,与对照组比较,RIP3蛋白表达明显下降(P<0.01)。与对照组比较,AngⅡ组存活率下降,凋亡率及ROS、RIP1和RIP3表达明显升高(P<0.01)。与AngⅡ组比较,Z-VAD提高细胞存活率,降低凋亡率和ROS水平(P<0.01),上调RIP1和RIP3表达(P<0.01);Nec-1和RIP3 siRNA降低坏死率(P<0.01),对凋亡率无明显影响(P>0.05),并能降低ROS、RIP1和RIP3的表达(P<0.01)。结论 AngⅡ能诱导大鼠肾小管上皮细胞发生程序性坏死,与RIP1、RIP3及ROS生成有关。