上海交通大学学报(医学版) ›› 2018, Vol. 38 ›› Issue (11): 1294-.doi: 10.3969/j.issn.1674-8115.2018.11.004
许晓巍,赵初娴,李肃,王椿,宋献民,白海涛
XU Xiao-wei, ZHAO Chu-xian, LI Su, WANG Chun, SONG Xian-min, BAI Hai-tao
摘要: 目的 ·探讨 HIF-1α-PDK1信号系统调控急性单核细胞白血病细胞糖代谢以及耐药的机制。方法 ·定量聚合酶链式反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测 U937细胞、 U937/DNR细胞和原代急性单核细胞白血病细胞中丙酮酸脱氢酶激酶 1(pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1)的 mRNA水平。采用基因沉默构建 siRNA HIF-1α质粒,分别转染作用于 U937和 U937/DNR细胞 24 h;噻唑蓝( MTT)比色法检测细胞增殖抑制, qPCR检测 PDK1 mRNA表达量,蛋白印迹法( Western blotting)检测 PDK1和多药耐药基因 1(multi-drug resistance gene 1,MDR1)蛋白的表达,流式细胞术检测染料 JC-1水平以评估线粒体膜电位变化,血气分析仪测定培养液中乳酸含量。用二氯乙酸盐( dichloroacetate,DCA)和柔红霉素( daunorubicin,DNR)作用于 U937/DNR和原代急性单核细胞白血病细胞 24 h;MTT比色法检测细胞增殖抑制, Western blotting检测 PDK1和 MDR1蛋白的表达。结果 · PDK1 mRNA在原代急性单核细胞白血病细胞、 U937细胞和 U937/DNR细胞中均高表达。沉默低氧诱导因子 -1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)可显著抑制 U937和 U937/DNR细胞的增殖活力、 PDK1和 MDR1蛋白的表达以及乳酸的生成。 DCA能够逆转 U937/DNR细胞和已复发的原代急性单核细胞白血病细胞对 DNR的耐药。结论 · HIF-1α-PDK1信号系统可调控细胞糖代谢并参与急性单核细胞白血病的耐药。
中图分类号: