基于实时荧光定量PCR技术的唐氏综合征嵌合体小鼠嵌合率检测和分析
孟晓伟 1,杨冠恒 1, 2,王云杰 1, 2,马晴雯 1, 2
2018 (11):
1277.
doi: 10.3969/j.issn.1674-8115.2018.11.001
摘要
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目的 ·建立一种定量检测唐氏综合征嵌合体小鼠各脏器嵌合情况的方法,并初步探究其不同器官中的嵌合规律。方法 ·分别针对唐氏综合征模型 Tc1小鼠细胞(三体细胞)内人源 21号染色体(记为 Hsa21)上 SIM2基因和小鼠 15号染色体(记为 Mmu15)上 Derl1基因设计引物,采用实时荧光定量 PCR(quantitative real time PCR,qPCR)技术对 SIM2和 Derl1进行检测来反映 Hsa21和 Mmu15的比例,并以此计算嵌合体小鼠各器官中 Tc1小鼠细胞的嵌合占比。结果 ·所鉴定的小鼠中有 3只为嵌合体小鼠。该 3只小鼠心脏组织 Tc1小鼠细胞嵌合率分别为 8.98%、21.71%和 57.70%,小脑组织分别为 5.62%、20.17%和 40.43%,大脑组织分别为 8.48%、15.35%和 20.45%,肝脏组织分别为 2.66%、6.50%和 16.84%,脾脏组织分别为 1.73%、3.80%和 11.80%。结论 ·基于 qPCR技术对不同染色体上的基因进行定量分析的方法可用于唐氏综合征嵌合体小鼠中三体细胞嵌合率的定量检测。 Tc1小鼠细胞在嵌合体小鼠的心脏、小脑、大脑、肝脏、脾脏均可发生嵌合,心脏组织的嵌合率偏向最高。
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