目的·探讨沉默信息调节因子2（silent information regulator 2，SIRT2）通过组蛋白H4第8位赖氨酸（H4K8）去乳酸化修饰对早期感染后巨噬细胞免疫表型的调节作用及相应机制。方法·使用佛波醇-12-肉豆蔻酸酯-13-乙酸酯（phorbol-12-myristate-13-acetate，PMA）诱导人单核细胞白血病THP-1细胞，使其分化为具有巨噬细胞特性的人血单核细胞株（PMA-primed THP-1，pTHP-1），再以脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激建立巨噬细胞感染模型。将未经LPS处理的巨噬细胞（pTHP-1）设为对照（CTRL）组，经过LPS处理的巨噬细胞设为感染（LPS）组。通过蛋白质印迹法（Western blotting）检测巨噬细胞中组蛋白乳酸化各位点修饰水平、组蛋白乙酰化各位点修饰水平及SIRT2蛋白水平；通过实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法检测2组间糖酵解限速酶乳酸脱氢酶A（lactate dehydrogenase A，LDHA）、肝脏磷酸果糖激酶（phosphofructokinase liver type，PKFL），糖酵解调剂因子低氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α），以及Sirtuin家族基因和HDAC家族基因表达水平；通过Transwell方法检测巨噬细胞趋化能力；使用慢病毒包装及细胞感染方法建立SIRT2过表达细胞系；使用RNA测序技术（RNA sequencing，RNA-seq）与染色质免疫共沉淀测序技术（chromatin immunoprecipitation sequencing，ChIP-seq）交互分析方法对组蛋白H4第8位赖氨酸乳酸化（lactylation of histone H4 lysine 8，H4K8la）特异性结合的基因进行差异性分析及通路富集分析。结果·相较于CTRL组，LPS组巨噬细胞糖酵解上调，组蛋白H4K8位点乳酸化水平显著增加（P<0.05），而组蛋白其余位点乙酰化水平未见显著变化。所有已知的具有去乳酸化修饰功能的酶中，仅SIRT2在LPS处理后出现显著降低（P<0.05），且SIRT2过表达可显著抑制巨噬细胞中组蛋白H4K8位点的乳酸化水平（P<0.05），但不影响组蛋白H4K8位点的乙酰化水平（P>0.05）。ChIP-seq与RNA-seq交互分析发现，组蛋白H4K8位点乳酸化修饰可调控巨噬细胞趋化相关基因，并且巨噬细胞的趋化能力在SIRT2过表达、H4K8la修饰水平下调后显著下降（P<0.05）。结论·SIRT2可通过去修饰组蛋白H4K8位点乳酸化改变趋化相关靶基因表达，从而降低巨噬细胞趋化能力。靶向SIRT2及H4K8la修饰将有助于控制巨噬细胞介导的炎症反应。
巨噬细胞具有较强的可塑性与异质性，可针对不同信号刺激发生功能转化，如转化为经典激活M1型（即M1型极化）、选择性激活M2型（即M2型极化）等。巨噬细胞M1/M2型极化的途径较为广泛，涉及核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）/丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）信号通路、白细胞介素-4（interleukin-4，IL-4）/信号转导与转录激活因子6（signal transduction and activator of transcription 6，STAT6）信号通路、Notch信号通路、无翼样糖蛋白/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路等。同时，巨噬细胞M1/M2型极化可不同程度地受到外泌体、代谢物、非编码RNA、电刺激、益生菌等的功能调节，其失衡与不同类型肝病的发生、发展关系密切。该文通过对该极化的作用机制进行梳理，发现巨噬细胞M1型极化在肝组织损伤、炎症反应及纤维化进程中起助推作用，巨噬细胞M2型极化则相反；其中，肝癌作为慢性肝病的晚期阶段，以巨噬细胞M2型极化增强、巨噬细胞M1型极化受损为特征。因此，该文关注巨噬细胞M1/M2型极化在不同类型肝病中的作用，以期能更好地确立巨噬细胞亚群靶向疗法。
目的·建设上海糖尿病临床专病大数据库，挖掘临床数据信息价值，开展真实世界研究工作。方法·糖尿病数据来源于上海申康医院发展中心的医联工程所汇集的临床数据，原始临床数据需经过脱敏加密、清洗、标准化、信息提取以及结构化等数据处理步骤，然后再根据具体研究目的和内容，采取医学统计或机器学习方法开展数据分析工作。结果·糖尿病数据库现已存储2013—2022年212万例糖尿病患者在37家医院1.5亿次的诊疗数据。通过临床分析展现了糖尿病疾病在现实环境中的基本特征和发展趋势；利用构建回顾性队列可以发现糖尿病的潜在风险因素；聚类分析、网络分析等机器学习方法能够揭示糖尿病疾病的内在规律和相互关系。结论·上海糖尿病临床专病大数据库的建立不仅可以总结和展现糖尿病临床现状，还可以利用真实世界临床数据开展研究获得更多具有临床价值的科研成果。
N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine，m6A）是一种调控真核细胞基因表达最常见的修饰方式，影响RNA的剪接、降解、稳定性以及蛋白翻译等过程。研究表明m6A甲基化修饰与肿瘤发生发展密切相关，在肿瘤免疫应答的相关过程中也发挥着重要的调控作用。m6A修饰参与调节免疫细胞的分化、成熟过程以及相关的抗肿瘤免疫反应。在肿瘤微环境中，m6A修饰也可影响免疫细胞的募集、活化和极化等，从而促进或抑制肿瘤细胞的增殖与转移，起到重塑肿瘤免疫微环境的重要作用。近年来肿瘤的免疫治疗逐渐应用于临床，如免疫检查点抑制剂治疗、过继性细胞免疫治疗等，都取得了较好的临床效果。通过靶向m6A修饰来干预机体免疫系统，如通过小分子抑制剂靶向失调的m6A调控因子、诱导免疫细胞重编程等，可提高抗肿瘤免疫反应，加强免疫细胞对肿瘤细胞的识别和杀伤能力。m6A修饰是肿瘤免疫治疗的一个新方向，具有潜在的临床应用价值。该文围绕m6A甲基化修饰对免疫细胞及肿瘤免疫应答的调控作用进行综述，探讨其免疫治疗的新思路。
血浆铜蓝蛋白（ceruloplasmin，Cp）是肝脏分泌的重要蛋白质，在人体的铜离子分布和运输中扮演关键角色，并在维持铜离子稳态方面起重要作用。此外，Cp还是一种亚铁氧化酶，参与人体内铁离子的代谢。研究表明，Cp与糖尿病和心血管疾病等代谢相关疾病有密切关系。近来研究发现，Cp也参与脂质代谢的调控过程。脂质代谢平衡涉及体内脂质合成、脂肪水解、脂肪酸氧化、脂质运输和吸收等过程。脂质代谢紊乱会导致人体代谢紊乱和心血管并发症的发生。Cp通过多种方式调控脂质代谢。一方面，它通过亚铁氧化酶活性参与调节氧化应激，即在铁代谢和氧化还原反应中发挥作用。另一方面，它通过铜及含铜的代谢酶参与胆固醇、脂蛋白和脂肪酸等物质代谢过程的调控。因此，Cp通过影响铜或铁依赖性酶和相关通路在铜和铁的稳态中发挥作用进而调控脂质代谢。尽管已经发现Cp与脂质代谢密切关联的现象，但仍需要进一步研究Cp进行脂质代谢调控的确切机制。该综述总结了Cp在脂质代谢中的作用及其研究进展，以期为脂质代谢紊乱相关疾病的研究和治疗提供新的思路。
痛情绪的发生与特定中枢神经环路功能和结构改变密切相关。疼痛伴发抑郁、焦虑、痛厌恶记忆等情绪状态时，其激活或抑制的神经环路不同。边缘系统杏仁核（amygdala，AMY）参与疼痛与焦虑、抑郁、痛厌恶记忆等情绪的调节，并与疼痛和情绪相关的大脑核团存在广泛联系，共同调控疼痛、焦虑、抑郁、痛厌恶记忆等反应。该文对AMY介导的痛情绪相关的主要环路进行了梳理，总结出与抑郁相关的神经环路包括中央杏仁核→丘脑束旁核（CeA GABA→PF Glu）、中缝背核→中央杏仁核（DRN 5-HT→CeA SOM）、中央杏仁核→腹外侧导水管周围灰质（CeA GABA→vlPAG GABA），与焦虑相关的神经环路包括腹侧被盖区→中央杏仁核（VTA→CeADA）、蓝斑→基底外侧杏仁核（LC NE→BLA），与痛厌恶记忆相关的神经环路为外侧臂旁核→中央杏仁核（lPBN CGRP→CeA CGRP）。其中，激活CeA GABA→PF Glu环路可导致抑郁伴疼痛，激活CeA GABA→vlPAG GABA环路可减轻抑郁导致的痛敏，激活DRN 5-HT→CeA SOM环路可以缓解疼痛感受和抑郁情绪；激活VTA→CeA DA环路可以减轻痛敏以及焦虑样行为，抑制LC NE→BLA环路可缓解疼痛导致的焦虑；激活lPBN CGRP→CeA CGRP环路可产生痛厌恶记忆。
胶原蛋白是人体含量最丰富的蛋白质之一，是细胞外基质的主要成分。胶原蛋白可以调节细胞行为，胶原蛋白表达失调可导致多种疾病，包括肿瘤。肿瘤中胶原蛋白主要由成纤维细胞产生，在肿瘤进展和转移中发挥重要作用。胶原蛋白作为肿瘤患者预后的预测因子，可能是有效治疗及预防肿瘤进展及转移的靶点，将来可能会研发出针对胶原蛋白及其受体的抗肿瘤药物。该文综述近年来新发现的胶原蛋白在肿瘤发生和发展中的作用，特别是胶原蛋白在维持肿瘤细胞休眠状态和免疫逃逸中的作用，以及胶原蛋白如何参与肿瘤细胞代谢。
肥胖是威胁人类健康的主要因素之一，过度脂肪堆积不仅对人体代谢、心血管系统有不利影响，同时也与多种肿瘤的发生率和致死率密切相关。脂肪酸结合蛋白4（fatty acid binding protein-4，FABP4）是一种主要在脂肪细胞和巨噬细胞表达的小分子蛋白，负责参与脂肪酸转运和应答反应。研究发现，FABP4水平不仅与体脂含量相关，还在多种肥胖相关的肿瘤细胞及肿瘤微环境中异常表达，且该异常表达与肥胖相关肿瘤的发生、转移、复发及患者预后均密切相关。由于FABP4在各种肥胖相关肿瘤中的表达不尽相同，提示其在不同肿瘤的发生、发展中的作用可能更为复杂。基于此，该文针对FABP4在多种肥胖相关肿瘤中发挥的不同作用进行综述。
IgA肾病（IgA nephropathy，IgAN）是全球最常见的肾小球肾炎，病理上以糖基化缺陷IgA1（glycosylation-deficient IgA1，Gd-IgA1）与其特异性抗体（Gd-IgA1-IgG）形成的免疫复合物在肾小球系膜区弥漫沉积为主要特征。尽管Gd-IgA1产生的原因和机制并不清楚，但越来越多的研究发现，产生Gd-IgA1的浆细胞主要来自肠道相关淋巴组织，由此形成“肠肾轴”理论。随之的多项研究发现在IgAN患者与健康人群之间，肠道菌群及其代谢物的组成存在明显差异。进一步研究发现肠道菌群可能参与IgAN发生和疾病进展，且调节肠道微生物的多项干预措施，如益生菌应用、粪便微生物群移植、调节肠道免疫等可用于IgAN的治疗；其中口服布地奈德控释胶囊为靶向回肠末端的肠道局部激素治疗，已被证实可以减少IgAN患者的尿蛋白水平并延缓肾衰。肠道菌群作为IgAN预防、诊断及治疗靶点具有广阔的前景，需要进一步的研究。
口腔颌面头颈肿瘤患者的肿瘤部位及大小、治疗方式以及预后情况会对其口腔功能及颈部活动产生重要影响，进而影响进食、言语、上肢运动等日常活动。口腔颌面头颈肿瘤术后早期康复可以加快功能恢复、缓解不适症状、提升生活质量、减少不必要的康复或治疗措施。制定口腔颌面头颈肿瘤临床康复护理路径，形成个体化康复方案，及早有效地开展护理干预，是当今口腔颌面头颈肿瘤临床工作的重点之一。目前国内外指南或共识较少关注言语功能、咀嚼吞咽功能、颈肩功能等方面的障碍，缺乏系统全面的康复护理指南或共识为口腔颌面头颈肿瘤护理提供实践指导。上海交通大学医学院附属第九人民医院组织北京、上海、四川、陕西、浙江、安徽的多位专家，参考以往相关文献，并结合临床护理一线的技术与经验，共同撰写《口腔颌面头颈肿瘤术后康复护理专家共识》，以期对口腔颌面头颈肿瘤患者在口腔护理、营养支持、皮瓣供区护理、气管切开护理、咀嚼吞咽康复、言语功能康复、颈肩功能康复、张口受限康复、风险识别与防范、随访方面提供技术指导。
目的·探究去唾液酸糖蛋白受体1（asialoglycoprotein receptor 1，ASGR1）在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）中的意义及潜在机制。方法·通过R语言分析癌症基因组图谱（The Cancer Genome Atlas，TCGA）数据库中ASGR1在肝癌患者中的表达情况并绘制相关生存曲线。利用人类蛋白质图谱（The Human Protein Atlas，HPA）数据库获得人体正常肝组织和肝癌组织的免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）数据来分析ASGR1的蛋白表达情况。利用流体动力学尾静脉注射（hydrodynamic tail vein injection，HTVI）递送方法，在免疫完全的小鼠肝脏中敲除Asgr1探究其在体内的致瘤功能，并通过蛋白免疫印迹法（Western blotting，WB）验证基因敲除效率。利用R语言进行京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路富集分析及相关性分析，利用基因探针富集（Gene Set Enrichment Analysis，GSEA）软件进行GSEA hallmark相关通路分析，利用实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）在小鼠肝癌组织中验证糖酵解关键基因表达水平。结果·ASGR1在肝癌组织中显著低表达，在肝癌患者中ASGR1的低表达与患者较差的总体生存期（overall survival，OS）、无疾病间隔（disease free interval，DFI）、无进展间隔期（progression free interval，PFI）和疾病特异性生存期（disease specific survival，DSS）相关；肿瘤分级程度越高的肝癌患者ASGR1基因表达水平越低。人体正常肝组织ASGR1蛋白的表达显著高于肝癌组织。在免疫完全的肝细胞癌小鼠模型中，小鼠内源性Asgr1敲除可增加肝组织中肿瘤结节的大小和数量。TCGA数据库中ASGR1低表达组肝癌患者富集到多条癌症及代谢相关通路，ASGR1表达与部分糖酵解关键基因表达呈负相关，Asgr1敲除组的小鼠肝癌组织中糖酵解水平高于对照组，提示ASGR1低表达很可能促进肝癌的生长发展，加强代谢重编程促进肿瘤的合成代谢发展。结论·ASGR1在肝癌患者中表达显著降低，与患者的预后呈正相关；小鼠体内敲除Asgr1可促进肝细胞癌的发生发展；ASGR1可以作为肝癌预后不良的潜在生物标志物和潜在治疗新靶点。
目的·利用微阵列芯片技术检测高脂饮食诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD）模型中肝组织mRNA的m6A甲基化修饰和基因表达的变化。方法·以6~8周龄雄性C57BL/6J小鼠为实验动物，高脂饲料喂养16周诱导建立NAFLD模型（高脂组，n=10）；另设基础组（n=10）为对照，给予含10%脂肪的基础饲料喂养。苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，H-E）染色评估小鼠肝组织病理改变，判断NAFLD模型是否构建成功。运用甲基化RNA免疫共沉淀技术（methylated RNA immunoprecipitation，MeRIP）和微阵列测序技术（microarray表达谱分析）检测2组小鼠肝组织中mRNA的m6A甲基化和表达水平变化。结果·基础组小鼠肝脏呈鲜红色，少见脂肪沉积；高脂组小鼠肝脏边界黄润，H-E染色可见肝细胞中脂滴弥漫浸润且相互融合，提示高脂饲料诱导的NAFLD模型构建成功。MeRIP-微阵列芯片检测结果显示，与基础组相比，高脂组小鼠肝脏中共有320个基因m6A甲基化修饰水平变化显著（P<0.05且变化倍数>1.5），其中有108个上调基因和212个下调基因。将组间m6A甲基化水平差异显著的基因与mRNA差异表达基因取交集，发现有163个基因m6A甲基化水平和mRNA表达水平均差异显著。结论·高脂饮食诱导的小鼠NAFLD模型中肝组织mRNA的m6A修饰变化显著，且该变化与mRNA的基因表达有关。
目的·探讨心房颤动（房颤）与认知障碍之间的因果关系。方法·采用两样本孟德尔随机化（Mendelian randomization，MR）分析方法，利用房颤的大规模全基因组关联研究（genome-wide association study，GWAS）汇总数据集，提取与房颤强相关的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）作为工具变量。基于公开的认知功能障碍的GWAS数据，分别提取SNPs与阿尔茨海默病性痴呆、帕金森病痴呆、血管性痴呆、路易体痴呆、额颞叶痴呆、未定义的痴呆、总体认知功能评估等的关联程度。采用逆方差加权法（inverse variance weighted，IVW）进行主要分析，Cochran′s Q检验、MR-Egger回归、留一法（leave-one-out）进行敏感性分析。为了验证结果的稳健性，使用不同GWAS数据进行重复分析及荟萃分析。结果·初次分析从一项涉及多达1 030 836名个体的全基因组关联研究荟萃分析中提取了101个SNPs作为工具变量，IVW结果未发现房颤与认知障碍的因果联系［痴呆：OR=1.032（95%CI 0.973~1.094），P=0.290；帕金森病痴呆：OR=1.004（95%CI 0.780~1.291），P=0.977；血管性痴呆：OR=1.123（95%CI 0.969~1.301），P=0.125；未定义的痴呆：OR=1.013（95%CI 0.910~1.129），P=0.807］。重复分析从FinnGen网站的房颤GWAS数据提取了27个SNPs作为工具变量，IVW结果与初次分析一致［认知功能：OR=0.999（95%CI 0.982~1.016），P=0.874；阿尔茨海默病性痴呆：OR=0.977（95%CI 0.943~1.012），P=0.193；路易体痴呆：OR=1.014（95%CI 0.898~1.145），P=0.826；额颞叶痴呆：OR=0.996（95%CI 0.745~1.333），P=0.980］。2次孟德尔随机化分析及荟萃分析均表明遗传预测的房颤与不同类型痴呆及总体认知功能评估均无相关证据。MR-Egger回归提示不存在水平多效性，留一法逐个剔除SNP后发现结果稳定。结论·未发现房颤与认知障碍之间的因果关系证据。在观察性研究中观察到的关联可部分归因于共同的生物学或共患病等混杂因素。
感觉神经属于周围神经系统的传入神经部分。它们的作用是接受机体内外刺激，传入中枢，形成感觉或反射。外伤、肿瘤侵犯、手术损伤等原因，均可导致感觉神经受损。感觉神经损伤可能会使患者的某些感觉器官功能减退或丧失，如视神经、听神经等重要感觉神经在受损后会给患者生活质量带来严重影响。目前临床上修复感觉神经的方法主要是自体神经移植，但其应用受到各种因素限制，神经功能的恢复效果也常常有限。干细胞具有多向分化潜能，可以分化成施万细胞，继而分泌神经营养因子促进轴突生长和髓鞘再生，施万细胞定向增殖形成宾格尔带，引导神经再生。干细胞也可以分化为神经元，构筑神经缺损的修复材料，是神经修复的理想选择。目前，以干细胞为基础，结合若干关键性的生物技术，例如利用生物聚合或人工合成的表面微图案化的神经导管实现神经缺损的桥接、利用微球实现细胞外基质蛋白和神经营养因子控制性释放等，形成的组织工程学技术正被广泛研究，并取得了一定的成果。该文就干细胞在几种主要的感觉神经如视神经、嗅神经、蜗神经及坐骨神经的感觉神经纤维等损伤修复中的研究进展进行综述，期望为干细胞的神经修复提供新的视角，拓宽干细胞在神经修复中的临床前研究，为后续的临床应用提供参考。
失眠障碍是最常见的睡眠-觉醒障碍，长期失眠对个体的身心健康有严重的负面影响。选择恰当的测量工具作为失眠的评价指标，对于科研和临床工作者而言尤为重要。国际上已存在多个常用的失眠评估量表，包括匹兹堡睡眠质量指数（Pittsburgh Sleep Quality Index，PSQI）、失眠严重程度指数（Insomnia Severity Index，ISI）等，这些量表广泛应用于评估失眠症状和睡眠质量，为研究者和临床医师提供了可靠的量化工具。除了常规的失眠评估量表，部分量表从睡眠的认知、睡眠卫生、不同人群睡眠情况的角度进行评估。在国内，学者们积极开发适用于中国人群的失眠评估工具，其中也包含针对特殊人群的睡眠评估。此外，还开发了一些具有中医特色的失眠评估量表，以满足国内对于中西医结合治疗的需求。研究者在量表的编制过程中，需要明确量表开发的目的，选择合适的心理测量学方法，并注重量表的可靠性和有效性；同时，开发能够区分失眠亚型的量表，并加强失眠相关量表的多样性。该文对失眠相关量表的汉化及开发现状进行了总结，并对现有量表提出了评价及未来展望。
目的·基于问题行为理论，构建结构方程模型，开展对于大学生社交网络成瘾的相关研究。方法·在上海市某高校一、二年级本科生中开展关于大学生社交网络成瘾的横断面问卷调查，采用Logistic回归分析性别、年级、学习压力、自尊、孤独感、抑郁、困顿感、挫败感、人际需求、社会支持、吸烟、饮酒、运动和学习成绩对社交网络成瘾的影响。以问题行为理论为理论框架，构建大学生社交网络成瘾的理论框架模型。结果·60.31%（591/980）的低年级大学生有社交网络成瘾情况。单因素Logistic回归结果显示：抑郁、自尊、孤独感、挫败感、困顿感、社会支持、人际需求、运动和学习成绩对社交网络成瘾有显著影响。研究构建的大学生社交网络成瘾的结构方程模型拟合结果良好［S－Bχ2/df=8.03，拟合指数（goodness-of-fit index，GFI）=0.924，比较拟合指数（comparative fit index，CFI）=0.909，非规范拟合指数（Tucker-Lewis index，TLI）=0.872，近似误差均方根（root mean square error of approximation，RMSEA）=0.096，标准化残差均方根（standardized root mean square residual，SRMR）=0.070］，提示人格系统与社会环境系统之间、人格系统与行为系统之间、社会环境系统与行为系统之间均相互影响（β=1.018，P=0.000；β=0.218，P=0.003；β=0.268，P=0.000）。人格系统和行为系统对社交网络成瘾的影响在统计学上不存在显著性，社会环境系统对社交网络成瘾有显著的正向影响（β=0.481，P=0.001）。结论·人格系统和行为系统通过影响社会环境系统间接影响社交网络成瘾，社会环境系统直接影响社交网络成瘾。对于低年级大学生社交网络成瘾问题，应当充分尊重大学生的特点，从系统3个层面共同入手，降低大学生社交网络成瘾风险。
卵巢癌是病死率最高的女性生殖系统恶性肿瘤，其发生发展过程涉及多种信号通路的异常调控。Wnt信号通路是一种高度保守的分子信号通路，在胚胎发育、组织稳态以及肿瘤发生发展等生理及病理过程中发挥重要作用。Wnt信号通路包括经典的Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）通路以及不依赖β-catenin转录活性的非经典Wnt通路，后者主要包括Wnt/平面细胞极性（Wnt/planar cell polarity，Wnt/PCP）通路和Wnt/Ca2+通路。以往研究主要集中于经典Wnt通路与肿瘤进展的关系，但近年来非经典Wnt通路逐渐受到重视，相关研究丰富了其在组织发育及肿瘤发生等生理及病理过程中的认知。现有研究提示，非经典Wnt通路在卵巢癌中受到异常调控，并与卵巢癌的分期及预后密切相关。非经典Wnt通路在卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭等多种生物学过程发挥重要作用，且该通路的变化与卵巢癌化学治疗（化疗）耐药也具有一定相关性。该文从上述多个角度对非经典Wnt通路在卵巢癌中的作用进行综述，并讨论基于非经典Wnt通路的卵巢癌靶向治疗研究进展，为开发新型靶向药物提供新的思路。
目的·利用单细胞RNA测序技术（single-cell?RNA?sequencing，scRNA-Seq）阐释冠状动脉粥样硬化（coronary atherosclerosis，CA）的细胞通信景观，挖掘主导细胞亚群及其关键基因。方法·下载GSE131778数据集并进行预处理、质控、降维聚类及注释；利用CellChat包进行细胞通信分析，识别主导细胞亚群。利用FindAllMarker函数，筛选主导细胞亚群与其他细胞亚群间的差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs），并构建其蛋白相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络，将Degree算法排序前五位的DEGs作为关键基因。将关键基因与CellChat分析出的细胞通信网络进行匹配和挖掘，获取关键基因参与的配体-受体对（ligand-receptor pair，L-R）及其介导的信号通路，并对结果进行可视化。构建动脉粥样硬化小鼠模型，并利用反转录聚合酶链式反应检测关键基因在颈动脉粥样硬化病变处的表达情况。结果·在CA病变处共鉴定出11个细胞亚群，包括平滑肌细胞、内皮细胞、巨噬细胞、单核细胞等。细胞通信分析结果显示，CellChat在11个细胞亚群中检测到70对显著的L-R和26条相关的信号通路；平滑肌细胞处于通信活跃状态，与其他细胞亚群间相互作用的次数和强度最显著，是主导细胞亚群。DEGs筛选结果显示，平滑肌细胞亚群和其他细胞亚群之间共有206个DEGs，其中ITGB2、PTPRC、CCL2、DCN、IGF1被识别为关键基因。关键基因介导的细胞通信分析结果显示：CCL2与ACKR1形成L-R，通过介导CCL信号通路参与平滑肌细胞与内皮细胞间的通信网络；ITGB2分别与ITGAM、ITGAX组成受体复合物，再与C3形成L-R介导补体信号通路，参与平滑肌细胞与巨噬细胞、单核细胞间的通信网络。动物实验对关键基因的验证结果同生物信息学分析的结果一致。结论·平滑肌细胞在CA病理过程中是主导细胞，与其他细胞间有广泛的通信网络，可通过CCL2-ACKR1、C3-（ITGAM+ITGB2）和C3-（ITGAX+ITGB2）介导的CCL和补体信号通路，与内皮细胞、巨噬细胞和单核细胞构建细胞通信网络。
目的·应用CRISPR/Cas9系统对小鼠间充质干细胞C3H10T1/2进行靶向Piezo1基因稳定敲除，探究Piezo1对间充质干细胞成骨分化能力的影响。方法·根据CRISPR/Cas9原理，设计2条靶向Piezo1基因的单链指导RNA（single guide RNA，sgRNA），利用Lenti-Cas9-GFP和Lenti-U6-sgRNA-mCherry载体分别构建表达Cas9的慢病毒和表达sgRNA的慢病毒。将2种慢病毒感染C3H10T1/2细胞，利用流式细胞分选技术对GFP和mCherry阳性的细胞进行筛选；挑取单克隆细胞，经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳验证，最终得到Piezo1基因片段敲除的单克隆细胞系。序列测定、实时荧光定量PCR（quantitative realtime PCR，qPCR）及细胞免疫荧光技术对构建的Piezo1基因敲除细胞（Piezol knockout C3H10T1/2，CPK）进行敲除效率验证。CCK-8实验检测敲除Piezo1对细胞增殖的影响；对构建成功的Piezo1基因敲除细胞进行体外成骨诱导分化，并进行碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）染色及茜素红染色，利用qPCR探究敲除Piezo1对细胞的成骨相关基因mRNA水平的影响。结果·琼脂糖凝胶电泳结果显示，敲除Piezo1的单克隆细胞菌液通过PCR扩增后产物出现阳性克隆。单克隆细胞的测序结果显示，敲除Piezo1的单克隆细胞的Piezo1基因在第4外显子中提前形成终止密码子TGA，无法正确翻译蛋白；qPCR验证了CPK中Piezo1基因在mRNA水平被抑制；免疫荧光显示CPK中Piezo1基因的敲除效率较高，基本阻碍Piezo1在细胞中的表达。CCK-8实验显示敲除Piezo1后细胞增殖能力下降（P<0.05）；ALP染色及茜素红染色结果显示敲除Piezo1后细胞成骨能力降低（P<0.05），且CPK中成骨相关基因如Ⅰ型胶原蛋白A1（α 1 type Ⅰ collagen，Col1a1）、Runt相关转录因子2（Runt-related transcription factor 2，Runx2）、成骨细胞特异性转录因子（osterix，Osx）以及碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，Alp）的mRNA表达水平降低（均P<0.05）。结论·利用CRISPR/Cs9基因编辑系统成功构建靶向敲除Piezo1基因的C3H10T1/2细胞系。敲除Piezo1能抑制小鼠间充质干细胞C3H10T1/2的成骨分化。
