刘祖银，李清，陈丽君，陈洁，刘友学
LIU Zu-yin, LI Qing, CHEN Li-jun, CHEN Jie, LIU You-xue
摘要：
目的 研究高浓度全反式视黄酸（atRA）抑制大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）成脂分化过程中，视黄酸核受体γ（RARγ）对过氧化物酶体增殖激活受体γ2 （PPARγ2）与CCAAT增强子结合蛋白α（C/EBPα）调控的机制。方法 体外分离、培养、诱导rBMSCs。成脂分化诱导液中，加入0.5、1.0 μmol/L atRA持续作用15 d后，real-time PCR和Western blotting分别检测RARγ、C/EBPα、PPARγ2的mRNA和蛋白表达水平。重组腺病毒过表达RARγ（over-RARγ）、沉默RARγ（si-RARγ）分别感染BMSCs，采用real-time PCR及Western blotting检测RARγ、C/EBPα、PPARγ2的mRNA及蛋白表达水平。Co-IP检测1.0 μmol/L atRA持续成脂诱导15 d后，明确RARγ与PPARγ2两者之间是否有相互作用。结果 诱导15 d结束时，与对照组相比，加入0.5、1.0 μmol/L atRA后，RARγ表达明显增加(P<0.01, P<0.001)，而PPARγ2、C/EBPα表达明显降低(P<0.001)。over-RARγ组：RARγ mRNA和蛋白表达均较对照组明显增加(P<0.01)，而PPARγ2、C/EBPα mRNA和蛋白表达均较对照组明显降低(P<0.05, P<0.01)。si-RARγ组：RARγ蛋白表达较对照组明显减低，但PPARγ2、C/EBPα却无明显变化。Co-IP结果提示：RARγ与PPARγ2蛋白之间有直接作用，形成复合物，未发现其与视黄酸反应元件（RARE）相结合证据。结论 高浓度atRA抑制rBMSCs成脂分化，是通过激活视黄酸信号通路RARγ而实现的。RARγ下调成脂分化通路PPARγ2、C/EBPα表达是通过直接作用于下游的PPARγ2蛋白而实现的。
