›› 2011, Vol. 31 ›› Issue (5): 543-.doi: 10.3969/j.issn.1674-8115.2011.05.004
简蔚霞, 林 宁, 董 艳, 苏 青
JIAN Wei-xia, LIN Ning, DONG Yan, SU Qing
摘要:
目的 探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对巨噬细胞尼克酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)表达的影响。方法 以人单核细胞株THP-1为体外细胞干预模型,经佛波酯诱导分化为巨噬细胞后,以0(阴性对照组)、50、100、250、500、1 000 μg/mL 的AGEs干预12 h,采用Western blotting方法检测细胞Nampt蛋白表达。以Western blotting检测结果选择合适浓度的AGEs处理巨噬细胞,分别于干预后0(阴性对照组)、3、6、12、24 h时点收集细胞,采用实时定量聚合酶链式反应(Real-Time PCR)技术和Western blotting方法检测巨噬细胞Nampt mRNA和蛋白表达。结果 在50~500 μg/mL的浓度范围内,AGEs处理组巨噬细胞Nampt 蛋白表达量均显著高于阴性对照组(P<0.01),且随干预浓度的升高呈现逐渐上升趋势,250 μg/mL和500 μg/mL AGEs处理组的干预效应最显著,设定后续实验中以250 μg/mL AGEs对巨噬细胞进行干预。250 μg/mL AGEs处理组巨噬细胞干预后各时点的Nampt mRNA和蛋白表达量均显著高于阴性对照组(P<0.01),且随干预时间的延长呈现逐渐上升趋势。结论 AGEs干预能促进巨噬细胞Nampt表达上调;提示AGEs可能部分通过Nampt途径激活巨噬细胞而参与糖尿病动脉粥样硬化的发生过程。