范竹萍,艾罗燕,陈荔萍,吴昌维,陈志威,苏大芝,许青青,王晓晗
FAN Zhu-ping, AI Luo-yan, CHEN Li-ping, WU Chang-wei, CHEN Zhi-wei, SU Da-zhi, XU Qing-qing, WANG Xiao-han
摘要:
目的 观察人肝癌HepG2细胞脂肪变模型中内质网应激发生的情况,探讨分子伴侣4-苯基丁酸(4-PBA)对该脂肪变模型中内质网应激、氧化应激和凋亡的影响。方法 使用0.5、1.0 mmol/L的混合脂肪酸分别干预HepG2细胞,在不同时间点采用Real-time PCR方法检测内质网应激相关蛋白CHOP和葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)mRNA的表达水平。以2 mmol/L的4-PBA干预脂肪变性HepG2细胞,在不同时间点检测CHOP和GRP78 mRNA的表达,氧化应激指标丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平,以及凋亡相关蛋白Caspase-3活性的变化。结果 与对照组比较,混合脂肪酸干预组HepG2细胞内CHOP、GRP78 mRNA的表达水平显著升高(P<0.05)。4-PBA干预可使脂肪变性HepG2细胞内CHOP和GRP78 mRNA的表达水平下调(P<0.05),MDA含量明显下降,SOD和GSH水平显著升高(P<0.05),Caspase-3活性减低(P<0.05)。结论 HepG2细胞脂肪变性时发生明显的内质网应激。分子伴侣4-PBA能减轻氧化应激和内质网应激,下调脂肪变性HepG2细胞Caspase-3活性,减轻细胞损伤。