目的·制备牙周致病相关坦纳菌编码的丝氨酸蛋白酶抑制剂（serine protease inhibitor，Serpin），分析其抑制靶蛋白酶的特异性及其结构特征。方法·通过氨基酸序列分析，选择人类口腔微生物组数据库（eHOMD）中的Serpin，将其转入大肠埃希菌中进行重组表达；采用镍离子亲和层析等方法制备重组蛋白，分析其抑制丝氨酸蛋白酶的特异性，并通过结构生物学手段解析其三维空间结构。结果·在坦纳菌中发现一个新的且活性中心P1残基为甲硫氨酸的Serpin，将其命名为Tannerpin-M，并成功地从大肠埃希菌BL21（DE3）中制备了高纯度的重组蛋白。进一步的活性检测结果表明重组Tannerpin-M可以有效地与粒细胞来源的蛋白酶（人中性粒细胞弹性蛋白酶、组织蛋白酶G和蛋白酶3）、胰弹性蛋白酶以及激肽释放酶1（KLK1）、KLK7等6种蛋白酶形成SDS稳定的共价复合物，其中Tannerpin-M抑制KLK7的二级反应速率常数为4.25×104 L/（mol·s）。解析分辨率为2.4 ?（1 ?=0.1 nm）的Tannerpin-M松弛态构象的晶体结构，结果显示Tannerpin-M具有显著延长的反应中心环，可以发生经典的抑制型Serpin从紧张态向松弛态转变的构象变化。结论·口腔致病菌编码的Tannerpin-M是一个典型的抑制型Serpin，其可以有效抑制粒细胞释放的丝氨酸蛋白酶，提示该口腔致病菌可能以此机制来抵抗人体免疫系统的攻击。
