上海交通大学学报(医学版) ›› 2019, Vol. 39 ›› Issue (7): 714-.doi: 10.3969/j.issn.1674-8115.2019.07.005
谢小华 1,陈泽 1,刘成博 1,杨奕辉 2,张拥军 1
XIE Xiao-hua1, CHEN Ze1, LIU Cheng-bo1, YANG Yi-hui2, ZHANG Yong-jun1
摘要: 目的 ·探讨鲨肝醇( batyl alcohol,BTA)对脂多糖( lipopolysaccharide,LPS)诱导的新生大鼠支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的病理学改变的改善作用及其作用机制。方法 ·将孕 16.5 d的 SD大鼠随机分为 Saline组、LPS组、LPS+BTA组,羊膜腔注射 LPS建立新生鼠 BPD模型; LPS+BTA组在注射 LPS同时及出生后 1~ 7 d每日注射 BTA干预,其他 2组注射等体积生理盐水。取出生第 1、3、7日新生鼠肺组织,通过苏木精 -伊红( H-E)染色和间苯二酚碱性品红染色观察肺泡化阻滞的改变;利用荧光定量 PCR和 ELISA法分别检测新生鼠肺组织中炎症因子白细胞介素 1β(IL-1β)mRNA水平及蛋白表达量。体外培养小鼠巨噬细胞系 RAW264.7,检测 LPS诱导及 BTA干预后 IL-1β mRNA水平及蛋白表达量。分离 SD大鼠骨髓巨噬细胞,给予 LPS刺激和 BTA干预,利用全转录组测序技术筛选 BTA抑制炎症的可能靶点。结果 · H-E染色结果显示,出生后第 1、3、7日 LPS+BTA组较 LPS组肺泡数量增多、次级间隔数量增多、平均内衬间隔减小(均 P<0.05);且经 BTA干预后肺组织 IL-1β mRNA及蛋白表达量均较 LPS组下调(均 P<0.05)。体外实验结果显示, LPS刺激后巨噬细胞 IL-1β mRNA和蛋白均较 Saline组显著增加(均 P0.000),加入 BTA后两者均较 LPS组减少(均 P<0.05)。全转录组测序结果显示, BTA抑制血小板应答蛋白 1(thrombospondin, Thbs1)、髓样细胞触发受体 1(triggering receptor expressed on myeloid cells 1,Trem1)、表面抗原分化簇 274(cluster of differentiation 274,Cd274)等促炎症因子基因的表达,促进补体 C1q C链(complement C1q C chain,C1qc)、RT1-Da(RT1 class Ⅱ,locus Da)、 RT1-Db1(RT1 class Ⅱ,locus Db1)等抗炎因子基因的表达。结论 · BTA可下调巨噬细胞中 IL-1β的表达,抑制炎症反应,进而改善 LPS诱导的 BPD新生鼠肺组织病理学改变。
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