白念珠菌ERG3基因敲除及其对耐药性的影响
王钰婷1, 2,刘锦燕2,史 册1,赵珺涛1, 2,项明洁1, 2
2020 (2):
163.
doi: 10.3969/j.issn.1674-8115.2020.02.004
摘要
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目的·构建白念珠菌ERG3基因敲除株,分析ERG3敲除对白念珠菌唑类药物耐药性的影响及其常见耐药基因的表达。方法·使用融合PCR和同源重组技术,以白念珠菌SN152 菌株基因组 DNA、带有筛选标记的质粒 DNA 为模板构建敲除组件。采用醋酸锂转染法将敲除组件转染入SN152中,从而获得ERG3+/-和ERG3-/-菌株。采用微量肉汤稀释法来判断SN152、ERG3+/-和ERG3-/-菌株对唑类药物的耐药性差异,同时使用实时荧光定量PCR检测菌株中的常见耐药基因。结果·获得白念珠菌ERG3敲除株。ERG3-/-菌株对唑类药物的耐药性明显高于ERG3+/-和SN152菌株。ERG3-/-菌株的常见耐药基因(CDR1、CDR2、MDR1、ERG11)表达显著上升(均P结论·成功构建白念珠菌ERG3敲除株。ERG3基因的敲除提高了白念珠菌唑类药物的耐药性,且该基因表达下调的同时伴随其他耐药基因的表达上调。
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